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實驗原理：

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠堿性磷酸酶（AKP）水平,。用純化的小鼠堿性磷酸酶（AKP）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入堿性磷酸酶（AKP）,，再與HRP標記的堿性磷酸酶（AKP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的堿性磷酸酶（AKP）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中小鼠堿性磷酸酶（AKP）活性濃度。

注意事項：

1,、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存,。

2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。

3,、各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。

4,、請每次測定的同時做標準曲線，建議做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

5,、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。

6,、底物請避光保存。

7,、嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

8,、所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9,、本試劑不同批號組分不得混用,。