細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無(wú)菌,、適宜溫度,、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存,、生長(zhǎng),、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法,。
1.細(xì)胞經(jīng)過(guò)運(yùn)輸后,,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈撞擊死亡破碎形成碎片,,是正?,F(xiàn)象,。貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900-1000rpm(約150g)離心3min,,棄上清,。加5ml PBS重懸細(xì)胞,,再900-1000rpm(約150g)離心3min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時(shí)碎片比較少,,傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟,;如果碎片很多,,建議PBS多洗幾次。
2.細(xì)胞生長(zhǎng)不均時(shí),,可以將細(xì)胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代,。
3.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢時(shí),,可以選擇提高血清濃度培養(yǎng)(最高不超過(guò)20%),,也可以根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),,選擇傳代細(xì)胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),。
4.不同細(xì)胞貼壁性差異比較大,所以消化時(shí)間差別較大,,20s-10min均有可能,,具體以細(xì)胞消化到相互分離但未脫落,,并可以輕輕吹下為準(zhǔn),嚴(yán)禁消化到細(xì)胞漂浮,??蛻粝^(guò)度導(dǎo)致細(xì)胞死亡,、漂浮、生長(zhǎng)緩慢,不提供免費(fèi)售后服務(wù),。
5.干冰發(fā)貨均為兩支,,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支,。若客戶同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方不提供免費(fèi)售后服務(wù),。
6.細(xì)胞狀態(tài)正常時(shí),,應(yīng)盡快凍存細(xì)胞保種,凍存后應(yīng)隨機(jī)抽取一支檢測(cè)凍存效果,。我方不對(duì)客戶凍存細(xì)胞導(dǎo)致死亡負(fù)責(zé),,客戶凍存細(xì)胞死亡不提供免費(fèi)售后服務(wù)。
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