ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),，受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。由于酶的催化效率很高,，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度,。ELISA可用于測(cè)定抗原,，也可用于測(cè)定抗體。
免疫標(biāo)記技術(shù)：
將抗原-抗體反應(yīng)與標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合,，用放射性同位素,、酶或熒光素標(biāo)記的已知抗體或抗原，通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記物,，間接測(cè)定未知的抗原或抗體。具體可分為放射免疫測(cè)定法,、免疫熒光技術(shù)和免疫酶測(cè)定法,。其中，免疫酶測(cè)定法是指用酶標(biāo)記的抗原或抗體進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng),，一般采用辣根過(guò)氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（AP）,，其特點(diǎn)有：
A.高度特異性；
B.高靈敏度,；
C.定性定量檢測(cè),。
在免疫測(cè)定的應(yīng)用：
1,、體液中的各種蛋白質(zhì)；
2,、激素,；
3、抗生素和藥物,；
4,、病原體抗原；
5,、利用純化的抗原檢測(cè)標(biāo)本中的抗體,。
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