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使用ELISA檢測試劑盒時需要遵守的問題有很多,?

閱讀:974      發(fā)布時間:2022-9-19
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  ELISA檢測試劑盒可實現(xiàn)多種分泌性蛋白(細胞因子、趨化因子,、生長因子等)的同時檢測和定量,,對于生物系統(tǒng)的綜合研究而言具有寶貴價值。不但具有更優(yōu)的效率,、速度和檢測范圍,。采用多重檢測能降低每個靶標結(jié)果的成本。
  ELISA檢測試劑盒的作用原理:
  1. 抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,,或是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,,并保持其免疫學(xué)活性;
  2. 抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性,;
  3. 酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果,。
  ELISA檢測試劑盒使用注意事項:
  1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,,但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。
  2.顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,,都有可能造成顯色劑不顯色,。所以在進行顯色反應(yīng)的時候,要先查看顯色劑本身的情況,。
  3.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,,然后在進行離心處理,。
  4.洗板時容易造成誤差: 因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,,這個時候帶有主觀色彩,,所以多清洗幾次,,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動。
  5.終止反應(yīng):在加終止劑的時候由于傾倒速度快,,差生氣泡,,造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒,。
  6.讀板:讀板的時候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈,。

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