總RNA提取試劑盒提供了一種快速,簡(jiǎn)單,,經(jīng)濟(jì)有效的方法,,可從全血,哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,細(xì)菌細(xì)胞和真菌細(xì)胞中分離總RNA,。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上,,同時(shí)使污染物通過柱被有效地洗去,。純的RNA用RE緩沖液洗脫,不用酚提取或醇沉淀,。
總RNA提取試劑盒使用注意事項(xiàng)如下:
1,、如果需要測(cè)量RNA的A260/A280的比值,建議使用RNA定量緩沖液對(duì)樣品稀釋后,,進(jìn)行測(cè)量,。
2、所有離心管,,槍頭及相關(guān)溶液都必須無RNA酶污染,。耐高溫器物可180°C烘烤4小時(shí)以去除RNA酶,其它器物去除RNA酶可考慮用0.01%的DEPC水浸泡過夜,,然后滅菌,,烘干。溶液需用DEPC水配制。加0.01%DEPC至重蒸水或MiliQ級(jí)水中,,處理過夜,,滅菌即成DEPC水。
3,、使用凍存的細(xì)胞或組織抽提總RNA的效果通常比新鮮的細(xì)胞或組織差一些,。因?yàn)樵诩?xì)胞或組織凍融過程中一些細(xì)胞或組織內(nèi)的RNase會(huì)被釋放出來并剪切樣品。如果不能及時(shí)抽RNA,,推薦先加入適量Trizol,,并裂解樣品后凍存。
4,、必須戴一次性手套操作,,且盡量不要對(duì)著RNA樣品呼氣或說話,以防RNA酶污染,。建議戴一次性口罩操作,。
5、Trizol含有毒物質(zhì)苯酚,,避免接觸皮膚或吸入,。為防止濺入眼睛,請(qǐng)戴防護(hù)眼鏡或使用透明保護(hù)屏,。如皮膚接觸Trizol,,請(qǐng)立即用大量去垢劑和水沖洗,如仍有不適,,請(qǐng)聽取醫(yī)生意見,。
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