MN9D小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞別名：MN9D細(xì)胞,，小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞,，培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%,； 二氧化碳 (CO2),，5%。
細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟：
1.吸走多余培養(yǎng)基,，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,；
2.吸干凈PBS后
加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細(xì)胞表面,，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化,；
（細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感，消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng),。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止,，禁止消化到細(xì)胞*漂浮,。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔,，不要吹出大量氣泡,。）
3.加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻,；
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min,，棄上清,，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一,，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定,，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代,。
注意事項(xiàng)：不同品牌胰-酶消化時(shí)間差別較大，注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài),。
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