A,、血液樣本
有些生理因素,，如吸煙,、進食、運動,、情緒波動,、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,，有些甚至還有晝夜變化,。因此血液標本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾，以條件一致為宜,，如無法避免,，應(yīng)在標本上注明該因素。
1．外周血
一般選取左手無名指內(nèi)側(cè)采血,，該部位應(yīng)無凍瘡,，炎癥，水腫,，破損,。如該部位不符合要求，以其他手指部位代替,。對燒傷病人,，可選擇皮膚完整處采血。由于部分血液常規(guī)檢測(如白細胞計數(shù),、分類等)受生理因素影響波動過大,，比較時宜使條件盡量一致。涉及到體內(nèi)出,、凝血功能的檢測項目(如血小板計數(shù),，出血時間或凝血時間等)的檢測，一定要注意了解患者是否用過抗凝,、促凝藥物,，以便在減少或避免干擾因素的影響。
2．靜脈血
除涉及各種止血和血栓檢測等項目需采用抗凝靜脈血血漿外,，目前絕大多數(shù)檢測項目的分析檢測可直接采用靜脈血的血清,。在血清檢測項目中，有些(如血糖,，血脂等)受飲食及晝夜因素影響較大,，一般以清晨空腹血標本為宜,；有些在血中衰變較快(血清酶活性測定如ACP活性等)，0~4℃貯存活性減弱也不一,，這些項目的檢測必須及時而快速,；有些(如肌酸激酶等)受運動等因素影響較大。抽血時避免溶血的發(fā)生也十分重要,，尤其涉及血鉀,，LDH等的測定。
B,、尿液樣本
同血標本一樣,，尿液標本受飲食、運動,、藥物量等因素的影響也較大,，特別是飲食的影響，故一般來說晨尿優(yōu)于隨機尿,。晨尿是指清晨起床后的第一次尿標本,，較濃縮和酸化，有形成分(如血細胞,，上皮細胞,，管形)相對集中便于觀察。隨機尿即隨意一次尿,，留取方便,，但受飲食、運動,、藥物影響較甚,，易于出現(xiàn)假陽性和假陰性結(jié)果，如飲食性蛋白尿,，飲食性糖尿,，維生-素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時收集的患者尿液)適用于尿糖,，尿蛋白和尿膽原的檢查,，此時的尿標本可增加試驗敏感性，檢出較輕微的病變,。12小時尿細胞計數(shù)即Addis計數(shù)(前晚8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液),，因時間較長，細菌易繁殖,，須加入防腐劑甲醛,。24小時尿(第一天晨8時排空膀胱后留取至次日晨8時的所有尿液)中化學(xué)物質(zhì)的定量，包括蛋白,，糖,，尿17-酮,、17-羥類固醇，兒茶酚胺,，Ca2+等,，檢測不同的物質(zhì)，選擇不同的防腐劑防腐,。清潔中段尿多用于尿細菌培養(yǎng),，要求無菌，沖洗外陰后留取標本,。所有尿標本的收集都應(yīng)足量,，最少12 ml,，最好50 ml,，定時尿須全部收集，對女性患者應(yīng)避免陰道分泌物,、經(jīng)血污染尿標本,。
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
C,、糞便樣本
糞便標本的檢測對判斷消化系統(tǒng)疾病有重要參考價值。采集時要求用干凈的竹簽選取含有粘液,、膿血等異常病變成分的糞便,，對外觀無異常的糞便須從表面、深處及糞端多處取材,。找寄生蟲蟲體及作蟲卵計數(shù)應(yīng)收集24小時糞便,。查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即檢查，從有膿血和稀軟處取材,，保溫送檢,。查日本血吸蟲蟲卵時應(yīng)取粘液、膿血部分,，孵化毛蚴時至少留取30g糞便,，且需盡快處理。檢查蟯蟲卵須用透明薄膜拭子于晚12時或清晨排便前自肛-門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢,。隱血試驗(化學(xué)法),，試驗前3日禁食肉類及含動物血食物并禁服鐵劑，維生-素C等,。所有糞便標本采集后1小時內(nèi)應(yīng)檢查完畢,，以防止有形成分受消化酶及pH的破壞,來不及檢測的,，應(yīng)及時用PBS進行緩沖處理，離心去上清保存,。
盡量采集干的糞便,，糞便過稀會較難處理且降低檢測的準確性。采集的重量應(yīng)大于 50 mg,，將糞便用 PBS 洗 3 次（最終糞便質(zhì)量：PBS 體積=1:9）,，用超聲粉碎（或搗碎）后于 5000×g 離心 10 分鐘，取上清檢測,。
D,、腦脊液樣本
腦脊液標本采集后立即送檢，放置過久將影響檢驗結(jié)果：如細胞變性,，破壞,，導(dǎo)致計數(shù)和分類不準；有些化學(xué)物質(zhì)如葡萄糖等將分解含量減少,；細菌發(fā)生自溶影響細菌的檢出率,。腦脊液抽取后一般分裝三個無菌管，第一管作細菌培養(yǎng),，第二管作化學(xué)分析和免疫學(xué)檢查,，第三管作一般性狀及顯微鏡檢查，三管的順序不宜顛倒,。因標本采集較難,，全部送檢和檢測過程應(yīng)注意安全。
E,、胸腹水樣本
與腦脊液標本一樣,，采集后的標本注意安全，及時送檢,。一般也分裝三管,，一管作常規(guī)細胞學(xué)檢查，一管生化檢查,，一管細菌培養(yǎng),，順序以與腦脊液相同為宜。
F,、前列腺液樣本
前列腺液標本由前列腺按摩后采集,，液量少時直接滴在載玻片上及時送檢，須注意防止標本蒸干,，量多時收集在潔凈干燥的試管中,。若按摩不出前列腺液，可檢查按摩后的尿液沉渣。
G,、精液樣本
精液標本采集前應(yīng)禁欲3~7天,，排凈尿液后可用手淫法或其他方法將精液直接排入干凈的容器中，保溫并及時送檢,。由于精-子生成日間變動較大,，一般應(yīng)檢查2~3次(每次間隔1~2周)方可做診斷。
將精液收集于無菌容器中,，正常精液射出體外呈稠厚的膠凍狀,，射出體外后需在室溫或 37 度水浴箱中使其在前列腺分泌的纖維蛋白溶解酶的作用下液化，變的稀薄,。待精液*液化后,，將精液 4000 rpm 離心 10 分鐘分離精漿進行檢測。
H,、陰道分泌物樣本
陰道標本采集前24小時應(yīng)禁止房事,、盆浴、陰道檢查,、陰道灌洗及局部上藥等,，取材所用器械需清潔。一般用鹽水浸濕的棉拭子自陰道深部或陰道穹后部,、宮頸管口等處取材，制成生理鹽水涂片后觀察陰道分泌物標本,，經(jīng)期的女性患者不宜檢查陰道分泌物標本,。
(二) ELISA的樣本實驗準備
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天就進行
檢測的樣本,，及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的，最好-70℃凍存?zhèn)溆?。標本?yīng)避免反復(fù)凍融,。
液體類標本: 包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清等,。
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
3. 尿液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實行,。
4. 細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。
5. 培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
6. 組織標本
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢
測,，其余冷凍備用,。
取牛奶10ml入離心管，加入10ml乙酸乙酯,，超聲震蕩30min,。
然后4000g離心10min（如兩相之間出現(xiàn)乳化層，則將樣品瓶放在80℃的水浴中約5min,，再離心）移取1ml乙酸乙酯層至另外試管中,，60℃氮氣流下蒸干，殘留物用緩沖液2ml緩沖后備用,，前處理過程約需2小時,。
取10ml牛奶10℃3500G離心10MIN，祛除上層脂肪,，取5ml脫脂奶粉加入150微升17.2%亞鐵氰-化鉀,，出現(xiàn)沉淀，漩渦混合,，然后加入150微升53.5%硫酸鋅,。再次漩渦混合。15攝氏度3500g離心10分鐘,，取上層清液用緩沖液1：2稀釋待用,，前處理過程所需1小時。
處理樣本的過程就是收集目標蛋白的過程,，由于蛋白容易變性,，降解，故該過程應(yīng)盡量溫和,。樣本處理之后的儲存也非常重要，尤其注意不要反復(fù)凍融,，樣本處理之后可分裝密封保存,，4 度保存應(yīng)小于 1 周，-20 度不應(yīng)超過 1 個月,，-80 度不應(yīng)超過 2 個月,。在標本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫，不應(yīng)加熱使之融解,。樣本的處理是實驗成功的第一步
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