植物總酚(Total Phenols,TP)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法100T/48S
注 意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定,。
測(cè)定意義:
植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于化妝品,、食品,、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
測(cè)定原理:
在堿性條件下,,酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原,,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,在760nm處有特征吸收峰,,測(cè)760nm處的吸光值,,即可得樣品總酚含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平,、烘箱,、粉碎儀、篩子,、超聲破碎儀、60%乙醇,、離心機(jī),、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板,、蒸餾水,。
試劑組成和配制:
提取液:60%乙醇,自備,。
試劑一:液體3mL×1瓶,,4℃保存。
試劑二:液體5mL×1瓶,,4℃保存,。
總酚提取:
直接檢測(cè)
測(cè)定操作表:
1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至760nm,,蒸餾水調(diào)零。
2,、 操作表
對(duì)照管 | 測(cè)定管 | |
樣本待測(cè)液(µL) | 10 | 10 |
試劑一(µL) | 50 | |
混勻,,25℃靜置2min | ||
試劑二(µL) | 50 | 50 |
H2O(µL) | 140 | 90 |
混勻,25℃靜置10 min,,于微量石英比色皿/96孔板中,,測(cè)定760nm吸光值,ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照,。 |
總酚含量計(jì)算公式:
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.808x+0.0012,,R2 = 0.9994
總酚含量(mg/g 干重)=(ΔA-0.0012 )÷2.808
= 0.356×(ΔA–0.0012 )
注意事項(xiàng):
1. 吸光值大于2,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,,注意計(jì)算公式里乘以稀釋倍數(shù),。
2. 試劑一對(duì)皮膚有一定的刺激性,請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施,。
3. Z低檢出限為2.4 μg/g,。
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優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司 | 下載次數(shù) |
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