土壤有效硼試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定,。
測定意義：
土壤中有效硼直接影響著植物的吸收和利用。
測定原理：
硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物,，在420nm有特征吸收峰,。
自備實驗用品及儀器：
天平、常溫離心機(jī),、震蕩儀,、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板,。
試劑組成和配制：
試劑一：液體5mL×1支,，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶,，4℃保存,。臨用前加8mL蒸餾水溶解，加0.125mL乙酸。
試劑三：粉劑×1瓶,，4℃避光保存,。臨用前加4mL蒸餾水溶解。
樣本處理：
新鮮土樣風(fēng)干,，過100目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積（mL）為1：2的比例（建議稱取約0.5g土樣,，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水,，沸水中浸提10min，待自然冷卻,，加入50μL試劑一,，震蕩5min，8000g ,，25℃離心10min,，取上清液待測。
測定操作表：
空白管 | 測定管 | |
樣本（μL） | 40 | |
試劑二（μL） | 80 | 80 |
試劑三（μL） | 40 | 40 |
H2O（μL） | 80 | 40 |
充分混勻,，25℃黑暗中靜置1h | ||
于微量石英比色皿/96孔板,，蒸餾水調(diào)零，測定420nm處吸光值A,，分別記為A空白管和A測定管,，△A=A測定管-A空白管 | ||
計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.3897x - 0.021，R2 = 0.9995
全硼含量（mg/kg）=（△A+0.021）÷ 0.3897÷（W÷V樣總）
= 2.56×（△A+0.021）÷W
V樣總：加入提取液體積,，1mL,，W：樣本質(zhì)量，g
b. 用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.1949x - 0.021,，R2 = 0.9995
有效硼含量（mg/kg）=（△A+0.021）÷ 0.1949÷（W÷V樣總）
=5.13×（△A+0.021）÷W
V樣總：加入提取液體積,，1mL，W：樣本質(zhì)量,，g
注意事項：
1. 配制好的試劑二4℃保存不可超過7天,。
2. 顯色時嚴(yán)格控制溫度并且避光，以免顯色劑見光分解,。
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優(yōu)利科（上海）生命科學(xué)有限公司 | 下載次數(shù) |
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WORD 文檔 |
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