土壤全鐵試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意 ：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定,。
測定意義：
鐵元素是一種十分重要的植物營養(yǎng)元素,，土壤中鐵含量直接影響著植物吸收利用以及生長代謝。
測定原理：
在pH2-9范圍內(nèi),，鹽酸羥胺將三價(jià)鐵轉(zhuǎn)化為二價(jià)鐵，與鄰菲羅琳反應(yīng)生成橙紅色配合物,，在510nm有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平,、常溫離心機(jī),、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板,。
試劑組成和配制：
提取劑：粉劑×1瓶,，4℃保存,。
提取液：液體100mL×4瓶，4℃保存,。
試劑一：液體2mL×1瓶,，4℃避光保存。
試劑二：液體6mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑三：液體4mL×1瓶，4℃避光保存,。
樣本處理：
新鮮土樣風(fēng)干,，過100目篩，按照土壤質(zhì)量（g）：提取劑質(zhì)量(g)為1：4的比例（建議稱取約0.1g土樣,，加入0.4g提取劑）緩慢加入提取劑于坩堝中,，邊加邊攪拌均勻，然后在馬弗爐中550℃熔融10min,，然后在920℃熔融30min,，趁熱取出坩堝，將熔融物轉(zhuǎn)入燒杯,，邊攪拌邊加4mL提取液,，必要時(shí)加蓋，從燒杯口加入,，防止溶液濺出,，溶解30min后，5000g ,，25℃離心10min,，取上清液待測。
測定操作表：
空白管 | 測定管 | |
樣本（μL） | 20 | |
試劑一（μL） | 20 | 20 |
試劑二（μL） | 60 | 60 |
試劑三（μL） | 40 | 40 |
H2O（μL） | 80 | 60 |
充分混勻,，25℃靜置20min | ||
于微量石英比色皿/96孔板,，蒸餾水調(diào)零，測定510nm處吸光值A,，分別記為A空白管和A測定管,，△A=A測定管-A空白管 | ||
計(jì)算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.1569x -0.0173，R2 = 0.9992
全鐵含量（mg/kg）=（△A+0.0173）÷ 0.1569×V反總÷（W×V樣÷V樣總）
= 254.94×（△A+0.0173）÷W
V反總：反應(yīng)總體積,，0.2mL,；V樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積，0.02mL,；V樣總：加入提取液體積,，4mL，W：樣本質(zhì)量,，g
b. 用96孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0785x -0.0173,，R2 = 0.9992
全鐵含量（mg/kg）=（△A+0.0173）÷ 0.0785×V反總÷（W×V樣÷V樣總）
= 509.55×（△A+0.0173）÷W
V反總：反應(yīng)總體積,，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中加入樣本體積,，0.02mL,；V樣總：加入提取液體積，4mL,，W：樣本質(zhì)量,，g
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優(yōu)利科（上海）生命科學(xué)有限公司 | 下載次數(shù) |
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資料大小 |
36KB | 資料類型 |
WORD 文檔 |
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