魚硫代硫酸鹽轉硫酶（TST）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用,。
檢測范圍： 96T
5U/L -180U/L
使用目的：
本試劑盒用于測定魚血清、血漿及相關液體樣本中硫代硫酸鹽轉硫酶（TST）活性,。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中魚硫代硫酸鹽轉硫酶（TST）水平,。用純化的魚硫代硫酸鹽轉硫酶（TST）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入硫代硫酸鹽轉硫酶（TST）,，再與HRP標記的硫代硫酸鹽轉硫酶（TST）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經過徹di洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的硫代硫酸鹽轉硫酶（TST）呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中魚硫代硫酸鹽轉硫酶（TST）活性濃度,。
試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品（320U/L） | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
160U/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
80U/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
40U/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
20U/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
10U/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5,。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。
11. 測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數,，即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果,。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,，如標本數量多，推薦使用排槍加樣,。
4． 請每次測定的同時做標準曲線,，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定,，計算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用,。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃,。
2．有效期：6個月
4
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務