IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)標(biāo)準(zhǔn)品樣品的描述每個小瓶包含一個糞腸球菌的物質(zhì)球體(CIP 106877)

IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)分別用于根據(jù)ISO 7218[1]和ISO 7899-2[2],，在馬血瓊脂或斯蘭內(nèi)茨和巴特利瓊脂上菌落計數(shù)測定糞腸球菌,。該制劑中的細(xì)菌細(xì)胞在室溫下不能存活。因此,，在分析過程中,，從冰箱中逐個拿出小瓶。在所有步驟中都要使用無菌耗材,，并在無菌條件下工作,。

馬血瓊脂（標(biāo)準(zhǔn)電鍍）

1。每個材料球使用10個適當(dāng)條件的介質(zhì)板,。

2.通過無菌地去除塞子,，打開含有材料球體的小瓶。

3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9 g/L),。等待30秒,，通過上下移液來均勻化。

4.通過將9份100µL和10個瓊脂平板上,，確保盡可能從小瓶中除去液體,。

5.使用一個一次性無菌撒布機(jī)(無玻璃撒布機(jī)）將溶解的材料均勻地攤鋪在板表面，避免板的邊緣,。

6.在最后一個板的瓊脂表面上輕輕上下移動其上的末端5次,，以幫助去除其上的任何剩余液體。

7.在室溫下干燥盤子30分鐘,，然后再倒置,。

8.在37°C±1°C下孵育14小時至24小時。

Slanetz和Bartley瓊脂（膜過濾）

1,。每個材料球使用20個適當(dāng)條件的介質(zhì)板,。

2.通過無菌地去除塞子，打開含有材料球體的小瓶,。

3.向小瓶中加入1 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9 g/L),。等待30秒，通過上下移液來均勻化,。

4.確保將19份50µL和一部分含有剩余溶液的液體分配到20個獵.鷹管上,，每個管中含有10 mL的氯化鈉水溶液(質(zhì)量濃度為0.9g/L),。

5.使用帶有真空歧管的膜過濾裝置在每個Falcon管中過濾溶液，并使用包含47 mm膜(孔徑0.45µm)的過濾漏斗：

5a,。將溶液倒在過濾器上,，吸出

5b。激活吸力以除去溶液

5c,。用10 mL的氯化鈉(質(zhì)量濃度為0.9 g/L)水溶液沖洗Falcon管,，關(guān)閉吸力后倒入過濾器。

5d.激活吸力,，取出溶液

5e,。重復(fù)沖洗（共清洗2次）

6.用無菌鑷子把過濾器放在瓊脂平板上。

7.在室溫下放置盤子30分鐘,，然后再翻轉(zhuǎn),。

8.在36°C±2°C下孵育40小時至44小時。

存儲

IRMM-355 糞腸球菌 (CIP 106877)標(biāo)準(zhǔn)品瓶應(yīng)立即使用,，也可以存儲在-20°C或-70°C,。如果儲存在-20°C下，應(yīng)避免稍后的溫度轉(zhuǎn)移回-70°C,，因?yàn)槲覀儗﹄S后的儲存溫度變化對細(xì)菌細(xì)胞活力和恢復(fù)的影響知之甚少,。然而，歐盟委員會不能對在客戶的場所儲存材料期間發(fā)生的變化負(fù)責(zé),，特別是對打開的樣品,。

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