SRM3655溶液中的聚糖標準品 (美國NIST)主要用作測量酶促釋放的 N-連接聚糖的校準標準,。 SRM 3655 的潛在應(yīng)用包括分析技術(shù)的基準測試和可比性，作為確保系統(tǒng)適用性和分析方法驗證的材料,。該材料還可用于對內(nèi)部校準器或控制材料進行賦值,。SRM 3655 由十三 (13) 種通常與單克隆抗體治療相關(guān)的聚糖水溶液組成。每種溶液都含有已知質(zhì)量分數(shù)的純化的游離還原聚糖,。

規(guī)格：

一個 SRM 3655 單元由 13 個 0.5 mL 小瓶組成,，每個小瓶含有大約 0.2 mL 冷凍溶液,。

聚糖的認證值：

表 1 中提供的 13 種聚糖的認證質(zhì)量分數(shù)和估計不確定度基于溶液的重量法制備以及綜合純度分析獲得的結(jié)果，以及使用液相色譜法確定的分析結(jié)果-串聯(lián)質(zhì)譜 (LC-MS/MS) 分析,。 NIST 認證值是 NIST 最有信心的值,，其準確性在于所有已知或可疑的偏差來源都已被調(diào)查或考慮在內(nèi) [1]。數(shù)值以質(zhì)量分數(shù)單位（微克/克）提供,，為方便用戶,，提供物質(zhì)濃度（微摩爾/升）。使用 22 °C 時的水密度 (0.9977 g/mL ± 0.00083 g/mL) [2] 和平均值,，相對每個聚糖的分子量和不確定性 [3],。

來源、準備和分析

來源和制備：用于制備 SRM3655溶液中的聚糖標準品 (美國NIST)的純化聚糖粉末是在 G.J. 實驗室通過化學酶合成方法 [9-13] 生產(chǎn)的,。烏得勒支大學（荷蘭烏得勒支）和喬治亞大學復(fù)雜碳水化合物研究中心（喬治亞州雅典）的恩賜,。

聚糖粉末在 NIST 的純水中通過重量分析法重構(gòu)，混合均勻,，然后分裝,。 SRM 3655 的單位在 -70 ℃ 以下冷凍保存直至使用。

分析：SRM 3655 價值分配中的所有分析均在 NIST 進行,。

通過 LC-MS/MS 分析測量聚糖質(zhì)量分數(shù)：使用 LC-MS/MS 分析實現(xiàn)了 SRM 3655 中聚糖質(zhì)量分數(shù)的定量測量,。在三重四極桿質(zhì)譜儀上使用正極性的多反應(yīng)監(jiān)測 (MRM) 分析單獨檢測聚糖。使用多孔石墨化碳分析色譜柱實現(xiàn) LC 分離,。使用 50 mmol/L NH4HCO2（流動相 A）和 0.1% (v/v) 甲酸的乙腈 (ACN) 溶液（流動相 B）從固定相中洗脫聚糖,。測量值校準到聚糖標準品，其純度和質(zhì)量分數(shù)在 NIST 進行了評估,。將市售的棉子糖材料按重量計加標到樣品和校準溶液中,，并用作 LC-MS/MS 漂移的內(nèi)部對照。 LC-MS/MS 分析在三到五個獨立組中進行,，在不同的日子里重復(fù)六到七次,。每個聚糖的兩個片段化轉(zhuǎn)變被歸一化為內(nèi)標信號。對兩種色譜分離的異頭異構(gòu)體（α 和 β）進行了標準化,。