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產品型號DNAdrop
品 牌其他品牌
廠商性質代理商
所 在 地北京市
更新時間:2022-03-15 09:49:31瀏覽次數(shù):248次
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乳液PCR擴增制備系統(tǒng) 高通量單細胞單分子液滴分選與封裝系統(tǒng) 可實現(xiàn)DNA或細胞封裝和高吞吐量分選。 這使得能夠以特別快的速度篩選大型復雜的基因庫,。 |
該系統(tǒng)是一種多功能和用戶友好型皮升級液滴發(fā)生器,,觸摸屏化操作,*自動化液滴生成,。用于準備DNA,,細胞和其他生物材料樣品,然后用于下游的高分辨率分析,。 可以安全,、快速地將單個分子、DNA文字片段,、單個細胞或單個細胞器與生化反應試劑一起封裝在高度穩(wěn)定的雙乳狀或單乳狀液滴中,。這些液滴能在PCR,、渦旋、孵育和長期儲存過程中保持穩(wěn)定,。
封裝液體藥物的系統(tǒng)
采用*專有微流體技術,,跨越基因和細胞研究的下一個前沿。它的*設計能幫助研究人員對人類,、
動物、植物和微生物的細胞和基因組獲得高分辨率的信息,。
可以在用戶友好型的工作流程中生成和分類雙乳液滴,,不需要任何使用過熒光細胞分類器的經驗。
工作流程從將100 kb的DNA的文字片段,、小單細胞或其他生物材料捕捉在高度穩(wěn)定的液滴中開始,,以用于諸如PCR和酶活性評價等測試當中。
然后,,根據(jù)內含物的熒光對液滴進行分類,,分離得到只含有感興趣內容物的液滴,用于下游高分辨率分析,,如:
●識別重排,如融合和倒置,。
●*,。
●識別病毒和轉基因整合位點。
●在單細胞水平評估酶活性,。
●進行高通量GFP篩選,。綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)是一種常用
的報告基因這些數(shù)以百萬計的液滴分別封裝分子,,細胞器,,或小細胞(高達6µm直徑)。每一個液滴都相當于一個反應室在其內進行單個分子或單個細胞分辨率水平的分析,。
液滴是什么樣子
基于微流體,,在一個簡單的工作過程中將數(shù)百萬個分子分成液滴,從而能夠高質量地靶向富集大片段(3E100 kb),,
d用于后續(xù)測序 ,,允許從幾毫微克的脫氧核糖核酸開始靶向富集長脫氧核糖核酸分子。該系統(tǒng)是基于分離數(shù)百萬個液滴中的長DNA文字片
段,,其中含有感興趣目標序列的液滴被熒光標記,,并使用流式細胞術進行分類,。該系統(tǒng)程序的終產品是可以通過測序研究的長脫氧核糖核酸分子的富集群體。是研究復雜基因組區(qū)域的有效富集技術,。
為什么要選擇該系統(tǒng):
它提供了從大基因文庫中準備基因材料的手段以用于高分辨率的篩查分析,。
幫助回答一系列的基因組學和分子生物學問題。
支持合成生物學的工作流程,,如酶進化及其路徑工程,。
具有用戶友好型接口,具有將微液體技術接入各實驗室的能力
乳液PCR擴增制備系統(tǒng) 階段劃分液滴系統(tǒng)
與適當?shù)囊旱畏蛛x,、測序和分析技術相結合,,該系統(tǒng)可應用于以下等幾個方面:
●長或短讀測序
●基因編輯分析
●無偏全基因組擴增
●酶活性評價
實現(xiàn)單分子或單細胞分辨率
提高基因組學和宏基因組學研究的分辨率,。使用我們系統(tǒng)以及測序建議和生物信息學工具來執(zhí)行一系列基因組學工作流程該系統(tǒng)在人類,、其他動物、植物和微生物DNA的長讀和短讀測序工作流程中證明了其性能,。
克服對植物龐大而復雜的基因組進行測序的挑戰(zhàn),。該系統(tǒng)在支持各種植物基因組學工作方面表現(xiàn)出色,包括:
特征不明顯的基因簇分析
由于參考基因組和植物品種之間的低對應性導致的間隙閉合
植物基因組結構重排的解析
生物合成基因簇的檢查
使用該系統(tǒng)封裝單個小細胞,,包括微生物和藻類,以及生物活性分子,。我們高度穩(wěn)定的雙乳化液滴提供了一種方法,,可以孵育單個活細胞進行分析,并對它們進行分類,,以在基于細胞的工作流程中獲得高分辨率,。Xdrop在封裝細胞核方面也有良好的表現(xiàn),其他細胞器的工作流程正在測試中,。
新應用
定向進化作為蛋白質工程領域的重要方法,,通過構建隨機突變庫,并用具有針對性的篩選方式對突變體的性質進行評估和分選,,從而實現(xiàn)酶功能在分子水平上的改造,。目前限制定向進化成功的關鍵仍是缺少真正高通量、通用型的高效篩選方法,。
互不相溶的兩相液體(輕石蠟油和水)在膜擠出儀內反復擠壓通過聚碳酸酯濾膜,,實現(xiàn)乳化過程并得到微液滴。具體研究包括:(1)乳化次數(shù)的優(yōu)化,。確定了一級乳化次數(shù)為15.5-20.5次,,二級乳化次數(shù)為25.5-30.5次,同步提高了單層和雙層微液滴的均一性。與常用的勻漿儀乳化法比較,,膜擠出儀法保持了操作簡便,、液滴生成迅速的特點,而且在微液滴的均一程度上有著顯著優(yōu)勢,。驗證了膜擠出儀法生成的微液滴中包裹單細胞的效率符合泊松分布,;(2)酶反應的表征。確定了在皮升(10-12L)級別的微液滴中能夠進行酶反應,,且熒光信號穩(wěn)定,。篩選系統(tǒng)能夠分辨不同底物濃度、不同酶濃度和不同酶活力形成的熒光信號差異,,證明了此系統(tǒng)用于篩選的可行性,;(3)酯酶活力的模式篩選實驗。以表面展示酯酶AFEST的大腸桿菌細胞作為陽性個體,,含有空質粒pGF101的大腸桿菌作為陰性對照,證明可在含大量陰性對照的群體中對少量有活性的陽性個體(如1/1000)進行富集,,單次分選高富集效率達到333倍以上,,顯示了該體系較高的篩選效率。經過優(yōu)化和表征,,“膜擠出儀法-FADS"體系的效率和穩(wěn)定性得到了顯著提升,,擁有進行實際突變庫篩選的巨大潛力。
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