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一,、實驗介紹
Cell Counting Kit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析,。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazan dye）,。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比,。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。
二,、實驗?zāi)康?/span>
1．藥物（也包括其他處理方式如放射線照射）對體外培養(yǎng)的細胞毒性的測定,；
2．細胞增殖及細胞活性測定。
三,、實驗步驟
四,、送樣運輸要求：
1 凍存細胞
凍存管寄送前，使用封口膜把凍存管口封嚴密,，凍存管單獨用自封袋存放,。干冰運輸。運輸時間在2天以內(nèi)干冰用量在10kg,，在2-4天,，干冰用量在20kg。
2 活細胞
使用T25瓶,，瓶蓋無孔,。
生長狀態(tài)良好的細胞，細胞密度在30%-40%為宜,，寄送前,，移去瓶內(nèi)舊培養(yǎng)基，添加新培養(yǎng)基至瓶頸部,，保留微量空氣,，擰緊瓶蓋，并用封口膜密封,，瓶身用75%表面消毒,，把瓶用無菌袋或自封袋包裝，然后放置在適當?shù)暮袃?nèi),，盒周圍用棉花等做防震防壓處理。當溫度低于10度是要加保溫措施,，如暖寶寶等,。
細胞培養(yǎng)條件備注完整，如培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度,，F(xiàn)BS用量等,。
備注：運送時間原則在4天以內(nèi)，如細胞生長速度快,，則加入的培養(yǎng)基血清可以減半,，細胞密度在20%-30%。
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