在試管中分析 TurboGFP 融合蛋白
熒光融合蛋白是研究蛋白質(zhì)定位和細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的常用工具。這些構(gòu)建體通常將靶蛋白的全部或至少一個(gè)功能域融合到多種類型的報(bào)告熒光蛋白中的一種,。二聚綠色熒光蛋白 TurboGFP 來(lái)源于橈足類 Pontellina plumata 的綠色熒光蛋白 CopGFP (Shagin et al., 2004),。它具有亮綠色熒光，大激發(fā)波長(zhǎng)為 482 nm,，大發(fā)射波長(zhǎng)為 502 nm,。TurboGFP 是一種快速成熟的蛋白質(zhì)——它在細(xì)胞內(nèi)的熒光信號(hào)比其他綠色熒光蛋白更早可見(jiàn)。TurboGFP 僅與水母 GFP 變體共享約 20% 的序列同一性,。因此,，大多數(shù)抗 GFP 抗體不與 TurboGFP 結(jié)合——包括我們?cè)?GFP-Trap 中使用的 GFP-Nanobody。

對(duì)于此類生化實(shí)驗(yàn)，通常使用允許純化的不同“標(biāo)簽"域設(shè)計(jì)第二種融合蛋白,。這些額外的體外分析可用于確認(rèn)“標(biāo)記"融合構(gòu)建體的功能,，以及提取可能在細(xì)胞環(huán)境中形成的多蛋白復(fù)合物。缺乏特異性,、可靠和有效的試劑限制了 GFP 和相關(guān)熒光融合蛋白在細(xì)胞生物學(xué)研究和直接生化分析中的使用,。

TurboGFP-Traps 利用與瓊脂糖珠或磁性瓊脂糖珠偶聯(lián)的超高親和力羊駝抗體片段。這些“納米抗體陷阱"非常適合

免疫沉淀,、免疫純化和免疫下拉實(shí)驗(yàn),，其純度（和產(chǎn)量）比傳統(tǒng)小鼠單克隆抗體高 10 倍。Nanobody-Trap 與多種源材

料兼容,，可用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、組織和器官,、細(xì)菌,、酵母甚至植物。這些試劑使您的 TurboGFP 融合成為免疫沉淀,、Co-IP,、質(zhì)譜、酶活性測(cè)量和 ChIP 分析候選者,。

你實(shí)驗(yàn)室喜歡的味道是什么,？
Nanobody-Trap 是與單價(jià)基質(zhì)（瓊脂糖珠、磁性顆粒）偶聯(lián)的高質(zhì)量結(jié)合蛋白,，用于對(duì)許多融合蛋白及其相互作用伙伴

進(jìn)行生化分析,。不同的格式允許您進(jìn)行大量的實(shí)驗(yàn)。十分流行的形式是與瓊脂糖珠相連的納米抗體陷阱,。瓊脂糖珠提供

大的結(jié)合能力和少的背景,，同時(shí)仍然易于使用。如果自動(dòng)化對(duì)您的實(shí)驗(yàn)室很重要,，那么磁性瓊脂糖顆粒是一個(gè)不錯(cuò)的選

擇,。純化的蛋白質(zhì)復(fù)合物與質(zhì)譜分析等下游分析兼容。

Nanobody-Traps 已經(jīng)檢查了超過(guò) 50 種熒光蛋白,，點(diǎn)擊查看,！

駱駝科單域抗體就像類固醇上的 IgG

被稱為駱駝科的動(dòng)物家族（駱駝、美洲駝和羊駝）產(chǎn)生沒(méi)有輕鏈的功能性抗體,，即所謂的“重鏈"抗體,。這些重鏈抗體

通過(guò)單個(gè)可變結(jié)構(gòu)域識(shí)別并結(jié)合其抗原。當(dāng)從其羧基尾部切下時(shí),，這些桶狀結(jié)構(gòu) (2×3 nm) 非常小,、天然存在且完整的

抗原結(jié)合片段 (MW 為 13 kDa)。這些稱為納米抗體的片段具有高特異性,、低納摩爾范圍內(nèi)的親和力和亞納摩爾范圍內(nèi)的解

離常數(shù)（通常比小鼠 IgG 好 10 到 100 倍）的特點(diǎn),。納米抗體的緊湊尺寸使其在高達(dá) 70°C 的溫度下極為穩(wěn)定,，即使在

2M NaCl 或 0.5% SDS 中也能發(fā)揮作用。這些小而強(qiáng)大的抗體片段可用于各種*的應(yīng)用,。他們將打開(kāi)您的研究可能性,。