MchanoCulture B1應用舉例：雙軸力學刺激椎間盤細胞

 CellScale生物力學設備細胞牽張拉伸儀

MechanoCulture B1用于為細胞培養(yǎng)物提供多軸拉伸刺激,。在這項研究中,，刺激小鼠椎間盤（IVD）細胞以研究基因表達的變化,。

椎間盤（IVD）是復雜的結構,，對于脊柱穩(wěn)定,、承重和運動至關重要,。它由三個截然不同但相互依存的組織組成：中央髓核（NP）,、纖維外環(huán)（AF）和錨定于椎骨的軟骨終板。盡管生理負荷對椎間盤穩(wěn)態(tài)至關重要,，并刺激增加的細胞外基質合成,，但過度負荷會引起一系列不可逆的反應。

細胞介導的反應導致組織結構和功能的破壞,。機械負荷對IVD不同細胞類型的作用之間的差異了解甚少,，調(diào)節(jié)這些反應的細胞途徑也是如此。使用高密度微團細胞培養(yǎng)物培養(yǎng)原代小鼠IVD細胞可以維持AF表型,。使用MechanoCulture B1設備將細胞暴露于環(huán)狀多軸應變后,，這種細胞培養(yǎng)策略可用于獲取AF細胞基因表達的變化。

力學刺激

初始接種后二十四小時,，對細胞進行機械加載,。該協(xié)議是在1 Hz下雙軸拉伸膜30分鐘，10％應變,。作為對照,，使用無菌膜將用于對照的樣品用無菌鑷子轉移至6 cm細胞培養(yǎng)皿中，并進行同樣的預處理和接種,。這些對照樣品可使用戶能夠監(jiān)控比較細胞生長,、細胞活力和形態(tài)。

刺激后第6和24小時收獲培養(yǎng)物用于RNA提取和基因表達分析,。在拉伸序列之后,，拉伸組件被拆開。小心地將膜從固定銷上取下,，并放入6cm的培養(yǎng)皿中,。立即使用相差顯微鏡對活細胞的形態(tài)進行成像。為了收獲細胞,，將1mL PBS直接添加到膜的頂部,，并使用細胞刮刀分離細胞,。將PBS中的細胞離心以獲得細胞沉淀。隨后將細胞沉淀物懸浮在1mL Trizol中,，用于隨后的RNA提取和基因表達分析,。

           更多介紹歡迎咨詢世聯(lián)博研（北京）科技有限公司 ！公司經(jīng)營多種生物力學儀器設備,。