臺(tái)式掃描電鏡觀察樣品要求在高真空中進(jìn)行,。無(wú)論是水或脫水溶液,在高真空中都會(huì)產(chǎn)生劇烈地汽化,,不僅影響真空度,、污染樣品,還會(huì)破壞樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu),。因此,,樣品在用電鏡觀察之前要進(jìn)行干燥,。干燥的方法有以下幾種: 1、冷凍干燥法
冷凍干燥法是將經(jīng)過(guò)冷凍的樣品置于高真空中,,通過(guò)升華除去樣品中的水分或脫水劑的過(guò)程,。冷凍干燥的基礎(chǔ)是冰從樣品中升華,即水分從固態(tài)直接轉(zhuǎn)化為氣態(tài),,不經(jīng)過(guò)中間的液態(tài),,不存在氣相和液相之間的表面張力對(duì)樣品的作用,從而減輕在干燥過(guò)程中對(duì)樣品的損傷,。
2,、臨界點(diǎn)干燥法
臨界點(diǎn)干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時(shí),其表面張力等于零的特性,,使樣品的液體*汽化,,并以氣體方式排掉,來(lái)達(dá)到*干燥的目的,。這樣就可以避免表面張力的影響,,較好地保存樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)。此法操作較為方便,,所用的時(shí)間也不算長(zhǎng),,一般約2~3小時(shí)即可完成,所以是常用的干燥方法,。
3,、空氣干燥法
空氣干燥法又稱自然干燥法,就是將經(jīng)過(guò)脫水的樣品,,讓其暴露在空氣中使脫水劑逐漸揮發(fā)干燥。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)便易行和節(jié)省時(shí)間,;它的主要缺點(diǎn)是在干燥過(guò)程中,,組織會(huì)由于脫水劑揮發(fā)時(shí)表面張力的作用而產(chǎn)生收縮變形。因此,,該方法一般只適用于表面較為堅(jiān)硬的樣品,。
臺(tái)式掃描電鏡對(duì)樣品的導(dǎo)電處理:
生物樣品經(jīng)過(guò)脫水、干燥處理后,,其表面不帶電,,導(dǎo)電性能也差。用掃描電鏡觀察時(shí),,當(dāng)入射電子束打到樣品上,,會(huì)在樣品表面產(chǎn)生電荷的積累,形成充電和放電效應(yīng),,影響對(duì)圖象的觀察和拍照記錄,。因此在觀察之前要進(jìn)行導(dǎo)電處理,,使樣品表面導(dǎo)電。常用的導(dǎo)電方法有以下幾種:
1,、組織導(dǎo)電法
用金屬鍍膜法使樣品表面導(dǎo)電,,需要特殊的設(shè)備,操作比較復(fù)雜,,同時(shí)對(duì)樣品有一定程度的損傷,。為了克服這些不足,有人采用組織導(dǎo)電法(又稱導(dǎo)電染色法),,即利用某些金屬溶液對(duì)生物樣品中的蛋白質(zhì),?脂類和醣類等成分的結(jié)合作用,使樣品表面離子化或產(chǎn)生導(dǎo)電性能好的金屬鹽類化合物,,從而提高樣品耐受電子束轟擊的能力和導(dǎo)電率,。
2、金屬鍍膜法
金屬鍍膜法是采用特殊裝置將電阻率小的金屬,,如金,、鉑、鈀等蒸發(fā)后覆蓋在樣品表面的方法,。樣品鍍以金屬膜后,,不僅可以防止充電、放電效應(yīng),,還可以減少電子束對(duì)樣品的損傷作用,,增加二次電子的產(chǎn)生率,獲得良好的圖象,。
立即詢價(jià)
您提交后,,專屬客服將第一時(shí)間為您服務(wù)