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做PCR實驗時常見的污染源都來自哪里

時間:2022/4/14閱讀:4678
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  PCR實驗室又叫基因擴(kuò)增實驗室,。是一種分子生物學(xué)技術(shù),,用于放大特定的DNA片段,,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng),,能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,,其精確度高達(dá)納米級別。
  PCR實驗室的污染來源有哪些,?
  1.樣本間交叉感染:
  收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴(yán)導(dǎo)致外溢,;不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖;移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌,;不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩,、反復(fù)吹吸導(dǎo)致氣溶膠形成擴(kuò)散,相互交叉污染,。
  2.實驗試劑污染:
  主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中,,由于移液器、容器,、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染,。加樣過程中,,因為PCR試劑對溫度十分敏感,,需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃,但這個過程也充滿污染風(fēng)險,。
  3.擴(kuò)增產(chǎn)物污染:
  大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴(kuò)增后的PCR反應(yīng)管意外開蓋,,這是PCR反應(yīng)中最主要、最常見的污染問題,。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大,,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限,所以極微量的PCR產(chǎn)物污染,,就可形成假陽性,。
  4.克隆質(zhì)粒污染:
  作為陽性質(zhì)控品的克隆質(zhì)粒外溢。
 

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