細胞培養(yǎng)室如何有效避免微生物交叉污染,？ | 細胞房消毒是一項非常重要的任務(wù),，因為它可以預(yù)防細胞培養(yǎng)中的污染和交叉感染。細胞培養(yǎng)中常見的生物污染包括細菌芽孢霉菌支原體噬菌體污染等,。對實驗室進行定期清潔,、使用高效型消毒劑是避免細胞培養(yǎng)過程中由于實驗室環(huán)境引起細胞污染的主要措施
對于細胞培養(yǎng)，污染是最大的敵人,，不管是設(shè)備,、試劑亦或是環(huán)境造成的污染，這是每個養(yǎng)細胞的同志所頭疼的事情,，我們先識別下污染的分類：
細菌芽孢污染
培養(yǎng)細胞受細菌污染后,，會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,，pH改變。污染后細胞發(fā)生病理改變,，生長不良,、胞內(nèi)顆粒增多、增粗,，最后變圓脫落死亡,。以白色葡萄球菌較為常見。
真菌污染
培養(yǎng)細胞受真菌污染后,，可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點,，有的散在生長，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁,；倒置顯微鏡下可見絲狀,、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養(yǎng)基中，有的呈鏈狀排列,。真菌污染后,，細胞生長變慢，但最后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡,。
支原體污染
支原體是沒有細胞核結(jié)構(gòu)的原核生物,，多吸附于細胞表面或散在于細胞之間，可抑制細胞的代謝和成長,，改變核酸合成,、影響細胞的抗原性、導致染色體改變等,。培養(yǎng)細胞受支原體污染后,，由于支原體生長緩慢，開始不易發(fā)現(xiàn),。部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢,，多數(shù)細胞污染后無明顯變化。若不及時處理,，會產(chǎn)生交叉污染,，又因常規(guī)培養(yǎng)基中預(yù)防細菌和霉菌的抗生素對它沒有作用，因此防治支原體的污染非常重要,。
噬菌體污
噬菌體是一種寄生于細菌上的病毒,，可以感染并破壞細菌。噬菌體污染會對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響,，影響實驗的可重復(fù)性和準確性,。此外，噬菌體污染還可能導致實驗結(jié)果的誤解和實驗人員的健康威脅。
二細胞培養(yǎng)過程中環(huán)境污染途徑
1,，取放細胞時引起的污染
細胞培養(yǎng)過程中,，取放細胞是最基本的操作，培養(yǎng)房開關(guān)門的瞬間,，環(huán)境中的微生物或多或少會進入培養(yǎng)箱中,，而且內(nèi)外溫差導致內(nèi)門冷凝水的產(chǎn)生，極易吸附微生物,，都是造成培養(yǎng)箱污染的風險因素,。
2，滅菌不到位造成的二次污染
細胞培養(yǎng)過程中,，因其它操作問題（如培養(yǎng)基潑灑,，水盤污染等），造成培養(yǎng)房的大規(guī)模污染也時常會發(fā)生,，此時就需要對培養(yǎng)箱進行滅菌消毒,，常規(guī)的消毒（如紫外照射）只能達到表面消毒的效果，特別是對真菌等頑固性污染,，無法進行有效滅菌，導致后續(xù)培養(yǎng)過程中細胞污染頻發(fā),。
三傳統(tǒng)消毒方式
在傳統(tǒng)的細胞房消毒方法中,，常用紫外線、高溫,、酒精等消毒方式,。
01、紫外線消毒
紫外線消毒是通過紫外線殺死或去除微生物,。
優(yōu)勢：適合無遮擋敞開型環(huán)境和空氣消毒,，能夠在短時間內(nèi)達到殺菌效果。使用成本相對較低,，由于不投加化學藥劑,，不會對水和環(huán)境產(chǎn)生影響。
缺點：殺菌效力較低,，無法殺滅霉菌（孢子）,、芽孢等高抗性微生物。一些被紫外線照射失活的細菌可形成“光復(fù)活",，另外一些細菌可能存在著“暗復(fù)活"現(xiàn)象,。紫外線燈套容易結(jié)垢，需頻繁清洗以維持效果,，另外紫外線存在老化問題,，要求現(xiàn)場操作人員具備較高技術(shù)工藝，及時測定衰減程度并進行校正或更換，無法達到可控,、可計量的消毒標準,。紫外線不能直接照射人體，所以只能在無人情況下使用,。受空間環(huán)境因素制約,，所以通常作為一種輔助性消毒措施。
02,、高溫消毒
高溫消毒是通過高溫殺死或去除微生物,。高溫消毒有很多優(yōu)點，例如能夠殺死微生物的內(nèi)部,、不會產(chǎn)生化學殘留物等,。但是，高溫消毒也有一些缺點,。首先,，高溫消毒需要使用高溫設(shè)備，這會增加成本,。其次,，高溫消毒需要一定的時間，因此需要進行計劃和安排,。最后,，高溫消毒可能會對一些細胞培養(yǎng)物造成損傷。
03,、酒精擦拭消毒
酒精擦拭消毒是常見的一種消毒方法,，但酒精易揮發(fā)，不穩(wěn)定,。只能用于物體表面消毒,，其消毒主要針對普通細菌，對高抗性的芽孢,、霉菌等無效,。
70%-75%乙醇優(yōu)勢是對細菌具有較好的殺滅作用，但對真菌的效力有限,，可以使用奧克泰士來解決乙醇無法較好解決的酵母,、霉菌、芽孢的污染問題,。
對于細胞培養(yǎng)實驗室來說,，最重要的是杜絕一切可能的污染源。
四如何有效避免污染
1.重視細胞房管理工作,，規(guī)范操作
定期進行細胞房清潔消毒工作,，規(guī)范實驗人員操作（如身著白大褂,、換鞋等），創(chuàng)造潔凈培養(yǎng)環(huán)境,。
2.避免頻繁查看細胞
做好實驗規(guī)劃,，減少培養(yǎng)箱門開關(guān)的頻率，取放細胞時需佩戴潔凈的手套,，并用少量的 70% 醫(yī)用酒精（過多會導致培養(yǎng)箱中殘留乙醇蒸汽）擦拭培養(yǎng)瓶/皿表面,，從而降低細胞培養(yǎng)箱污染的風險；
3.定期維護和滅菌,，預(yù)防污染
定期清潔維護,，培養(yǎng)箱內(nèi)用水滅菌后使用并定期更換，選擇培養(yǎng)箱時,，可優(yōu)先考慮有自動滅菌功能的培養(yǎng)箱,。細胞房一旦發(fā)生污染，及時進行消毒滅菌工作,。
奧克泰士高效型殺孢子劑,，滿足潔凈區(qū)和實驗室的苛刻滅菌要求：
01）快速高效殺滅芽孢、霉菌等高抗性微生物,，
02）全面殺滅真菌,、細菌、病毒等各種類型的微生物,。
03）食品級生態(tài)型,，無色無味，呵護員工職業(yè)健康,。
04）良好的材料兼容性，基本無腐蝕,，適用于金屬,、橡塑等各種材料。同時,，作用完畢后分解物只有水和氧氣,，使用安全，沒有刺鼻氣味,，環(huán)保型殺孢子劑,。