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細胞培養(yǎng)主要常見污染有哪些,?如何高效殺滅?

時間:2023/2/10閱讀:967
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細胞作為重要的實驗模型廣泛應用于各類生物實驗, 幾乎所有科研實驗室中都需進行細胞培養(yǎng),。細胞培養(yǎng)過程中最大的威脅就是細胞污染, 凡是混入細胞培養(yǎng)環(huán)境中, 對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為污染,。細胞一旦遭到污染,所有的實驗結果都會變得毫無意義。因此, 及時檢測并鑒定出所培養(yǎng)的細胞是否被污染至關重要,。微生物污染是細胞培養(yǎng)中的一個主要問題,,但是可以采用一系列程序來防止或消除污染。對實驗室進行定期清潔、使用高效型消毒劑是避免細胞培養(yǎng)過程中由于實驗室環(huán)境引起細胞污染的主要措施,。



細胞培養(yǎng)主要常見污染

細胞培養(yǎng)污染主要分為兩類,,一是化學污染物,例如:培養(yǎng)基,、血清和水中的雜質,、內毒素、增塑劑和去污劑,。

二是生物污染物,,例如:細菌、霉菌,、酵母,、病毒、支原體,、原蟲以及其他細胞系的交叉污染,。

那么究竟微生物造成細胞污染我們又該如何應對?



一,、微生物污染分類


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01

細菌污染

細菌污染是細胞培養(yǎng)中最常見的污染,,其污染主要來源于實驗室環(huán)境、實驗人員(實驗服),、實驗用具等,,甚至在細胞培養(yǎng)過程中添加抗菌素(一般為預防劑量),也可能因為操作不慎而引起污染,。

種類:造成細菌感染最常見的有革蘭氏陽性菌如枯草桿菌,、葡萄球菌等;大腸桿菌,、假單胞菌等革蘭氏陰性菌也會造成細菌感染,。

解決方法:

日常清潔時,在工作前和工作期間,,對于細菌污染,,特別是在發(fā)生任何潑濺后,應使用70%-75%的乙醇擦拭工作臺面,。


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02

真菌污染

真菌污染是細胞培養(yǎng)過程中最常見的另一種污染,,尤其在霉雨季節(jié),霉菌污染尤為嚴重,。另外由于真菌可以通過孢子繁殖,,因此一旦污染很容易發(fā)生擴散。

種類:常見的真菌感染有煙曲霉菌,、黑曲霉菌,、毛霉菌,、白色念珠菌和酵母菌污染等。

解決辦法:

對于真菌污染,,酒精對真菌的效力有限,,可以使用奧克泰士即用型殺孢子劑來解決乙醇無法較好解決的酵母、霉菌,、芽孢的污染問題,。


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03

支原體污染

支原體是一種大小介于細菌和病毒之間,并獨立生活的原核微生物,,廣泛存在于人和動物體內,。

種類:細胞培養(yǎng)中常見的支原體有口腔支原體、精氨酸支原體,、萊氏無膽甾原體,、豬鼻支原體、肺炎支原體和發(fā)酵支原體,,其中前四者占據支原體污染的絕大比例,。

支原體污染具有隱蔽性,他們可以與細胞長期共存,,培養(yǎng)基一般不渾濁,。大部分細胞被污染后似乎無明顯變化,,但其實支原體會抑制細胞生長,,并且導致染色體畸變等,對細胞培養(yǎng)實驗影響巨大,。

解決方法:

可以使用過氧化氫銀離子溶液,,從源頭遏制支原體污染,科學-精準消毒,,生態(tài)無毒無殘留同時呵護實驗人員的職業(yè)健康,,可以放心使用!


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04

黑膠蟲污染

黑膠蟲是一種生物還是非生物,,學術界至今還有爭議,。這里我們暫且將其認作是一種微生物。黑膠蟲污染主要來源于血清,。

特點:黑膠蟲污染起初對細胞并無影響,,當達到一定數量時則會影響細胞生長。受黑膠蟲污染的細胞液通常清亮無變化,,在高倍顯微鏡下可以觀察到點狀片狀的游動小體,,做布朗運動

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05

原蟲污染

原蟲:培養(yǎng)液可輕微渾濁,,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,,輕微活動,,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態(tài)不好,,邊緣不清楚,,細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng),。這種共生是非常普遍的,,但他們的數量小,細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長,,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,,最終形成惡性循環(huán)。

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06

病毒污染

病毒作為一種比支原體更小的微生物,,體型在nm級,,很難用常規(guī)方法檢測到。病毒污染分為外源性和內源性,,污染主要來源為細胞系,,常見于雜交瘤細胞。

特點:病毒污染的細胞液通常清亮無變化,,大部分被污染的細胞也不會產生形態(tài)及病理現象,,小部分病毒會造成細胞變圓、腫脹,、脫落,。

病毒污染可用血細胞吸附實驗、免疫熒光抗體法以及電子顯微鏡法檢測,,但其清除是十分困難的,,一旦不幸被污染,建議直接重新引入高質量細胞株,。

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總結:

Oxytech


第一步:使用前后,,應對工作臺面進行消毒,并定期清潔周圍區(qū)域和設備,。
第二步:日常清潔時,,在工作前和工作期間,特別是在發(fā)生任何潑濺后,,應使用70%乙醇擦拭工作臺面,。(70%-75%乙醇優(yōu)勢是對細菌具有較好的殺滅作用,但對真菌的效力有限,,可以使用奧克泰士來解決乙醇無法較好解決的酵母,、霉菌、芽孢的污染問題,。)
第三步:細胞房環(huán)境要做全面的消殺,,以及人員手部等防止二次污染?。?/span>




二,、奧克泰士微生物控制專家


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過氧化氫銀離子復合溶液

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