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安捷倫蛋白質(zhì)組學樣品制備 — MARS 多重親和去除系統(tǒng)
樣本的復雜程度和蛋白質(zhì)濃度的大跨度動態(tài)范圍一直是蛋白質(zhì)組學研究面臨的最大挑戰(zhàn),,如何減少蛋白樣品的復雜程度,,降低動態(tài)范圍,,進而增加下一步分析的靈敏度和分辨率就成為蛋白質(zhì)組學流程中樣品前處理的最重要步驟,。
比如在血液中,,蛋白質(zhì)的豐度差異巨大,,跨度可達 12 個數(shù)量級,其中高豐度蛋白如白蛋白,、免疫球蛋白 IgG 和 IgA,、纖維蛋白原、轉(zhuǎn)鐵蛋白等占比極高,,可達 97-99%,。然而,質(zhì)譜技術在檢測中存在傾向性,,更易識別相對豐度較高的蛋白質(zhì)信號,,這使得低豐度蛋白——往往是疾病特異性標志物——的檢測變得困難。為了提升對這些關鍵低豐度蛋白的檢測能力,,研究者們正致力于開發(fā)預處理技術,,以降低高豐度蛋白的影響,從而揭示那些在疾病診斷和治療中具有重要意義的低豐度生物標志物,。這一策略對于提高疾病診斷的準確性和深度具有重大意義,。
安捷倫 MARS 多重親和去除系統(tǒng),可用于鑒定和表征血清,、血漿和其它生理體液中發(fā)現(xiàn)的高價值,、低豐度蛋白和生物標志物。 Mars 多重親和去除系統(tǒng)可重復而特異性地去除人生理體液中的 14,、7 或 6 種高豐度蛋白,,以及鼠生理體液中的 3 種高豐度蛋白 (詳細見如下列表)。
多重親和去除系統(tǒng)選擇指南
Agilent MARS 多重親和去除系統(tǒng)的優(yōu)點
高通量處理能力和靈敏度
可一次性去除 14 種,、7 種,、6 種、2 種或 1 種高豐度蛋白質(zhì),,多達蛋白總量的 94%-99%,。從而將檢出蛋白標志物的靈敏度提高至 ng/ml 水平。
高容效性和特異性
特異性抗體與層析介質(zhì)的空間靶向性共價結(jié)合以及優(yōu)化的結(jié)合洗脫體系保證了最大限度的結(jié)合能力與特定高豐度蛋白的去除,。
高重現(xiàn)性和利用率
可利用率高,,多達 200 次以上的高效重復使用,大大節(jié)省單次實驗的成本,。
多選擇性
產(chǎn)品規(guī)格靈活,,適合不同實驗室的需求,,可提供 HPLC 色譜柱和離心小柱 2 種形式和多種規(guī)格。
強兼容性
與大多數(shù)液相色譜儀器(色譜柱)或臺式離心機(離心小柱)完全兼容,、實現(xiàn)無縫銜接式分析,或者分離樣品可以直接用于 2D,、LC/MS 或其它分析技術的下一步分析。



圖示結(jié)果為同一色譜柱 1,、100,、150、200 次的分離去除效果的疊加比對結(jié)果,,說明 MARS 色譜柱的分離去除的高重現(xiàn)性和利用率
為了保證液相色譜柱和離心小柱的最佳表現(xiàn),,安捷倫提供了使用 Mars 多重親和去除系統(tǒng)液相色譜柱所需要的所有消耗品和附件,以保證色譜柱壽命和樣品重復性最大化的優(yōu)化條件,。
該試劑盒為 4.6 x 50 mm 液相色譜柱處理約 200 份樣品,,用 4.6 x 100 mm LC 柱處理約 100 份樣品,和 200 個離心小柱所用的緩沖液 A 和緩沖液 B,。
特殊配方的緩沖液 A 和上樣緩沖液可最大限度地減少蛋白質(zhì)之間的相互作用,,以避免由于低豐度蛋白與高豐度蛋白的結(jié)合而導致的不必要的流失。
特殊配方的緩沖液 B,,洗脫緩沖液用來破壞抗體-蛋白之間的相互作用,,便于將高豐度蛋白從柱子上洗脫下來,從而提高色譜柱的使用效率,。
MARS 多重親和去除系統(tǒng)配套附件與試劑盒
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