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快速了解如何精準測試核酸熱解鏈溫度
核酸研究
在核酸研究領域,天然的功能核酸(如各種miRNA,、IncRNA以及shRNA等)和人工篩選的功能核酸(如脫氧核酶,、核酶及適配體等)不斷被發(fā)現(xiàn)或篩選出來。在基因功能研究,、藥物發(fā)現(xiàn),、生物傳感器探針等領域的應用研究越來越多,尤其是核酸藥物(如反義核酸,、小干擾RNA等)的陸續(xù)上市,,使得核酸成為當前生命科學和藥物研究的熱點之一。而核酸的高級結構是其行使這些功能的物質(zhì)基礎,,因此高級結構的穩(wěn)定性是核酸應用中需要考慮的至關重要的因素,。對于核酸這類的較大的分子藥物,紫外光譜是研究其結構變化的可行且簡單的方法,。
核酸結構的特性
1 核酸結構隨溫度的變化是可逆的,,且不會使核酸變性。在一定的溶液條件下,,一個核酸序列依賴氫鍵和靜電作用在低溫形成特定的高級結構,,芳香性堿基發(fā)生堆積,產(chǎn)生減色效應,,導致紫外吸收值降低,。
2 當溫度升高時,氫鍵和堿基堆積等弱相互作用被逐漸破壞,,紫外吸收值逐漸升高,。因此,配備溫度控制的紫外光譜儀非常適合研究核酸結構的穩(wěn)定性,。
3 隨溫度的升高或者降低,,當核酸的紫外吸收值達到高值的一半時,所對應的溫度被定義為核酸的熔點,,用Tm表示,。Tm的大小反應核酸結構的穩(wěn)定性的高低。當Tm值越大,,核酸的高級結構越穩(wěn)定,。
基于以上特性,控溫型紫外光譜儀在核酸結構研究中能發(fā)揮獨一無二的作用,。
Cary3500UV-Vis分光光度計可搭配多種不同配置的控溫附件,,并為核酸研究用戶帶來精準的測試結果,。儀器采用了獨家的空冷控溫技術,升溫速率可以從0.1℃/min到40℃/min,,不僅能夠分辨核酸高級結構變化中的多種形態(tài),,同時,一體化的附件設計理念也可避免傳統(tǒng)水控溫裝置繁雜的管線和工作噪聲,。
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