二手液相色譜儀由儲液器、泵,、進樣器,、色譜柱、檢測器,、記錄儀等幾部分組成,。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,,被流動相載入色譜柱(固定相)內,,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時,,經(jīng)過反復多次的吸附-解吸的分配過程,,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,,通過檢測器時,,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來,。
流動相不過濾
因為塵?;蚱渌魏坞s質微粒都會磨損柱塞、密封環(huán),、缸體和單向閥,,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾,,而常用的方法是濾過,,可采用Millipore濾膜(0.2μm或0.45μm)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒(或片),。輸液泵的濾器應經(jīng)常清洗或更換,。
使用后不及時清洗泵
流動相不應含有任何腐蝕性物質,含有緩沖液的流動相不應保留在泵內,,尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下,。如果將含緩沖液的流動相留在泵內,由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,,就可能析出鹽的微細晶體,,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。
因此,,必須泵入純水將泵充分清洗后,,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水),。
流動相走空
泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完,,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán),,最終產生漏液,。
沒有流動相流出,又無壓力指示怎么辦,?
可能是泵內有大量氣體,,這時可打開泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉,,將氣泡排盡,,也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環(huán)磨損,,需更換,。
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