二手液相色譜儀其他常用檢測器還有示差折光檢測器RID,、蒸發(fā)光散射檢測器ELSD,、熒光檢測器、電噴霧檢測器CAD,。液相色譜其他常用檢測器原理及優(yōu)缺點有哪些,?
示差折光檢測器RID
RID是一種通用檢測器,對所有樣品都有響應,。
原理
示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的,。光從一種介質(zhì)進入另一種介質(zhì)時,,由于兩種物質(zhì)的折射率不同就會產(chǎn)生折射,。只要樣品組分與流動相的折光指數(shù)不同,就可被檢測,,二者相差愈大,,靈敏度愈高,在一定濃度范圍內(nèi)檢測器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比,。
優(yōu)缺點
優(yōu)點是通用,,沒有不能檢測的。
缺點:靈敏度低,,一般來說有關物質(zhì)檢測不能用它,,RID一般用于含量測定;另一個缺點由它的原理決定,,只能等度,,所以多組分的分離存在問題。還有平衡時間過長,,對環(huán)境要求高(尤其是室溫的波動)也是讓操作人員困擾的因素,。
蒸發(fā)光散射檢測器ELSD
一種新型的通用檢測器,用于不易揮發(fā)的組分,。靈敏度一般來說介于紫外檢測器和示差折光檢測器之間,。
原理
用惰性氣體霧化洗脫液,在加熱管(漂移管)中將流動相蒸發(fā),,樣品顆粒進入檢測器散射激光光源發(fā)出的光,,光信號轉(zhuǎn)化為電信號被輸出,。原理看起來很高大上,且靈敏度也還可以,,面對如此多的沒有紫外響應的化合物,,理論上說應該可以一統(tǒng)江湖了。事情總有但是,,下個章節(jié)詳細評論ELSD的優(yōu)缺點,。
優(yōu)缺點
優(yōu)點就是通用,不論有沒有紫外響應,,它都有響應,,只要揮發(fā)性弱于流動相即可。且可以走梯度,,可以用于分離復雜的混合物,。但是……缺點也很多。讓人無法接受的缺點是濃度與響應者不呈線性,,二者的對數(shù)呈線性關系,。線性非常差,線性范圍不大,,相關系數(shù)非常差,,還有截距非常大。由于這個缺點,,我想大家已經(jīng)明白該檢測器單點外標法不可行,,所以該檢測器一般用于外標兩點法(供試品響應值需在兩個對照品之間,不允許外延)檢測含量,;有關物質(zhì)很少用該檢測器,。大家應該能夠理解,每個雜質(zhì)都要配制兩個不同濃度的對照品溶液,,且供試品響應值在兩個對照之間(做不到的,,雜質(zhì)的量無法預測,不像含量),,這是一間多么讓人崩潰的事情,。
另一個缺點是流動相需要能揮發(fā),也就是意味著不能存在不易揮發(fā)的組分,,也就是說的磷酸鹽系列不能用了,。還有需要提高氣體,操作繁瑣,,會產(chǎn)生有害氣體等,。
熒光檢測器
熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器,,可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物,。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學衍生化生成熒光衍生物,,再進行熒光檢測。其檢測濃度可達0.ng/ml,,適用于痕量分析,;一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高個數(shù)量級,但其線性范圍不如紫外檢測器寬,。
近年來,,采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導熒光檢測器大大地增強了熒光檢測的信噪比,因而具有很高的靈敏度,,在痕量和超痕量分析中得到廣泛應用,。
原理
化合物受紫外光激發(fā)后,發(fā)射出比激發(fā)光波長更長的光,,稱為熒光,;熒光強度 (F) 與激發(fā)光強度 (I0) 及熒光物質(zhì)濃度 (C) 之間的關系為:F=.3QKI0εCl;F=KC,,Q為量子產(chǎn)率,,K為熒光效率,ε為摩爾吸光系數(shù),,l為光徑長度,。從電子躍遷的角度來講,熒光是指某些物質(zhì)吸收了與它本身特征頻率相同的光線以后,,原子中的某些電子從基態(tài)中的振動能級躍遷到較高的某些振動能級,。電子在同類分子或其他分子中撞擊,消耗了相當?shù)哪芰?,從而下降到電子激發(fā)態(tài)中的振動能級,能量的這種轉(zhuǎn)移形式稱為*輻射躍遷,。由振動能級下降到基態(tài)中的某些不同能級,,同時發(fā)出比原來吸收的頻率低、波長長的一種光,,就是熒光,。被化合物吸收的光稱為激發(fā)光,產(chǎn)生的熒光稱為發(fā)射光,。熒光的波長總要長于分子吸收的紫外光波長,,通常在可見光范圍內(nèi)。熒光的性質(zhì)與分子結(jié)構有密切關系,,不同結(jié)構的分子被激發(fā)后,,并不是都能發(fā)射熒光。
優(yōu)缺點
熒光檢測器優(yōu)點是靈敏度非常高,,可以達到ppt級別,。缺點是適用范圍窄,,僅適用于被激發(fā)后能產(chǎn)生熒光的物質(zhì),該缺點限制了熒光檢測器的應用,。
電噴霧檢測器CAD
一種新型的通用檢測器,,賽默飛公司出品,目前處于保護期間,。靈敏度優(yōu)于ELSD,。
原理
步驟一:檢測器將分析物轉(zhuǎn)化成溶質(zhì)顆粒。顆粒的大小隨著被分析物的含量而增加,。步驟二:溶質(zhì)顆粒與帶正電荷的氮氣顆粒相撞,,電荷隨之轉(zhuǎn)移到顆粒上 – 溶質(zhì)顆粒越大,帶電越多,。步驟三:溶質(zhì)顆粒把它們的電荷轉(zhuǎn)移給收集器,,通過高靈敏度的靜電檢測計測出溶質(zhì)顆粒的帶電量,由此產(chǎn)生的信號電流與溶質(zhì)的含量成正比,。
優(yōu)缺點
優(yōu)點同ELSD,,但是靈敏度更高。賽默飛的宣傳中將其推崇的神乎其神,,但是它也有但是,。缺點也同ELSD,線性較差,,但優(yōu)于ELSD,。在全量程范圍內(nèi)都是非線性響應,但CAD的重現(xiàn)性更好且在小濃度范圍內(nèi)響應基本呈線性,。CAD雖然將原理改為使顆粒帶電檢測收集的電信號,,使得濃度與響應者在一定范圍內(nèi)直接呈線性關系。但是顆粒的形成過程是一個非物質(zhì)本身屬性決定的過程,,也就意味著響應是不穩(wěn)定的,。不同于紫外檢測器,紫外吸收是物質(zhì)本身的屬性,,不會更改,,擁有良好的重現(xiàn)性。
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