做好液相色譜儀的日常維護保養(yǎng),養(yǎng)成良好的使用習(xí)慣,,能大大地降低故障率,,減少停機和降低維修成本。我們從液相色譜儀的高壓泵,、進樣器,、檢測器這幾個主要結(jié)構(gòu),來探討在日常使用中需要注意的事項,。
高壓泵的保養(yǎng)
泵是液相色譜的核心,,泵將流動相從溶劑瓶輸送到液相流路系統(tǒng)中,并要在高壓下保持流量和壓力的穩(wěn)定,。狀態(tài)正常的高壓泵是液相色譜準確分析的基礎(chǔ),,所以平日一定要重視對泵的維護。
1. 泵壓力波動
很多情況下,,泵的問題反映在壓力上,,壓力波動又是常見的一類問題。泵正常的壓力波動通常會在2%以內(nèi),,且平穩(wěn)規(guī)律,;不正常的波動通常由氣泡和鹽造成,。如果流動相中的氣泡沒有被脫氣機除掉而到了泵以后,,就會造成壓力波動,通常我們可以通過重新清洗(purge)流路和再次脫氣流動相加以解決,。
由鹽造成的波動主要是因為流動相中加入了濃度較高的緩沖鹽,,在含鹽流動相與有機相混合的時候,,鹽會有微小的析出,從而導(dǎo)致壓力異常波動,,解決這類問題可以考慮適當降低鹽的濃度,,或者使用甲醇取代乙腈有機相。如果一定要用到此類流動相,,可以考慮在有機相中加入一定比例的水,,然后適當提高梯度結(jié)束的終點。
2. 過濾白頭保養(yǎng)
在泵的維護里還有一項常做的工作就是更換清洗閥上的過濾白頭,,通常判斷的標準是純水以5mL/min流速清洗的時候,,如果壓力超過1MPa則考慮更換。根據(jù)更換下來的過濾白頭,,可以大致判斷儀器的使用狀況,。如果白頭是白色的且不臟,但是堵,,那有可能是流動相中有鹽析出造成的,;如果白頭是灰黑色的,這是常見的狀況,,是由于泵頭密封墊磨損造成的,;如果白頭是黃色、綠色等怪異的顏色,,儀器污染較嚴重,,可能是流動相里的微生物造成的。
除此之外,,在泵的使用過程中,,常常會遇到更換流動相的情況,這種更換是指從反相溶劑更換到正相溶劑或者反過來的過程,。這個過程要考慮流動相的兼容性,,常用的正反相色譜溶劑是不互溶的,所以在更換期間,,一定要用異丙醇沖洗系統(tǒng),,保證管路里所有的原有溶劑都被異丙醇替換掉后再更換流動相。
進樣器的保養(yǎng)
進樣器分手動和自動兩大類,,雖然兩者工作模式不同,,但使用的要點是基本一致的。
1. 防止交叉污染
自動進樣器常見的問題是交叉污染,,交叉污染產(chǎn)生的原因很直接,,樣品殘留在進樣針內(nèi)外表面,并隨下一次進樣進入色譜系統(tǒng),。要解決交叉污染,,主要靠清洗,。自動進樣器都會有洗針的功能,如果樣品濃度較高或者是吸附性比較強,,一定要打開此功能,;如果未打開洗針功能,污染可能已經(jīng)殘留在了針座或流通閥上,,那么這兩個部件需及時超聲清洗,。
出現(xiàn)在自動進樣器上的另外一個問題是峰面積重現(xiàn)性差,考慮可能與自動進樣器吸取樣品有關(guān),。首先觀察樣品的液面是不是足夠高,,以保證進樣器可以吸到樣品。排除這個問題后,,再察看自動進樣器的設(shè)置,,對于一些粘度大的樣品,要降低自動進樣器的吸取速度,。
2. 精細操作
手動進樣器的操作要點大致相同,,應(yīng)使用液相色譜儀專用平頭進樣針,進樣時插針應(yīng)插到底,,不使用時將針頭留在進樣器內(nèi),,使用前后都要及時清洗。
檢測器的保養(yǎng)
目前市場上檢測器的種類繁多,,而且各有特性,。以常用的紫外(VWD)/二極管陣列(DAD)檢測器來說,這兩類都是紫外類的檢測器,,雖然光路設(shè)計不同,,但是本質(zhì)原理都是相同的。
1. 光源部分
檢測器中非常重要的部件是光源,,光源對發(fā)射能量有要求,,一旦能量衰減到一定程度,就會出現(xiàn)基線噪聲變大,,靈敏度降低等一系列影響使用的問題,,因此光源是一個消耗品。通常紫外燈的壽命是2000h,,當?shù)竭_這個時限的時候,,我們就要特別關(guān)注燈的能量狀況,可以通過儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”功能來判斷,,測試的結(jié)果會分別評估低,、中、高三個波長段的能量,一旦某個波長段的測試結(jié)果顯示失敗,,就表示需要更換燈。
2. 檢測池
檢測器中另一個重要部件是檢測池,,也叫流通池,。通常大家關(guān)心的一個問題是檢測池被堵掉,因為檢測池通常不是很耐壓,,所以一旦被堵就很可能造成損壞,。事實上檢測池通常不太容易被堵,原因是幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會被色譜柱攔下了,,所以堵塞檢測器的東西基本都不是來自樣品的,,很可能是后來“產(chǎn)生”的,比如含鹽流動相殘留在檢測池中導(dǎo)致鹽析出,。
液相色譜儀是一種高精密儀器,,在日常使用中的維護保養(yǎng)工作細致謹慎,需要每一位使用者在實踐中不斷地摸索,。
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