二手液相色譜儀的很多問題都能在色譜圖中體現(xiàn)出來,。近期,很多用戶咨詢關(guān)于液相色譜圖的各種問題,,皆及時得到解決,,今天我們匯總一下二手液相譜圖問題解決方法,,希望能夠讓大家使用液相色譜時能夠防患于未然!
以下為您總結(jié)11種關(guān)于二手液相譜圖問題解決方法:
(一)二手液相譜圖峰拖尾的原因和解決方法
1,、篩板阻塞:反沖色譜柱,,更換進(jìn)口篩板,更換色譜柱,;
2,、色譜柱塌陷:填充色譜柱;
3,、干擾峰:使用更長的色譜柱,,改變流動相或更換色譜柱;
4,、流動相PH選擇錯誤:調(diào)整PH值。對于堿性化合物,,低PH值更有利于得到對稱峰,;
5、樣品與填料表面的溶化點發(fā)生反應(yīng)圖:加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑,,更改色譜柱,。
(二)二手液相譜圖峰前延的原因和解決方法
1、柱溫低:升高柱溫,;
2,、樣品溶劑選擇不恰當(dāng):使用流動相作為樣品溶劑;
3,、樣品過載:降低樣品含量,;
4、色譜柱損壞:反沖色譜柱,,填充色譜柱,。
(三)二手液相譜圖峰分叉的原因和解決方法
1、保護(hù)柱或分析柱污染圖:取下保護(hù)柱再進(jìn)行分析,。如果必要更換保護(hù)柱,。如果分析柱阻塞,拆下來清洗,。如果問題仍然存在,,可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染,運用適當(dāng)?shù)脑偕胧?。如果問題仍然存在,,入口可能被阻塞,更換篩板或更換色譜柱,。
2,、樣品溶劑不溶于流動相:改變樣品溶劑,。如果可能采取流動相作為樣品溶劑。
(四)二手液相譜圖峰變形的原因和解決方法
樣品過載:減少樣品載量
(五)二手液相譜圖早出的峰變形的原因和解決方法
樣品溶劑選擇不恰當(dāng):減少進(jìn)樣體積,,運用低極性樣品溶劑,。
(六)二手液相譜圖早出的峰拖尾程度大于晚出的峰的原因和解決方法
柱外效應(yīng):調(diào)整系統(tǒng)連接(使用更短、內(nèi)徑更小的管路),,使用小體積的流通池,。
(七)二手液相譜圖K‘增加時,脫尾更嚴(yán)重的原因和解決方法
1,、二級保留效應(yīng),,反相模式:加入三乙胺(或堿性樣品),加入乙酸(或酸性樣品),,加入鹽或緩沖劑(或離子化樣品),,更換一支柱子;
2,、二級保留效應(yīng),,正相模式:加入三乙胺(或堿性樣品),加入乙酸(或酸性樣品),,加入水(或多官能團(tuán)化合物),,試用另一種方法;
3,、二級保留效應(yīng),,離子對:加入三乙胺(或堿性樣品)。
(八)二手液相譜圖酸性或堿性化合物的峰拖尾的原因和解決方法
緩沖不合適:使用濃度50-100mM的緩沖液,,使用Pka等于流動相PH值的緩沖液,。
(九)二手液相譜圖額外的峰的原因和解決方法
1、樣品中有其他組份:正常,;
2,、前一次進(jìn)樣的洗脫峰:增加運行時間或梯度斜率,提高流速,;
3,、空位或鬼峰:檢查流動相是否純凈,使用流動相作為樣品溶劑,,減少進(jìn)樣體積,。
(十)二手液相譜圖保留時間波動的原因和解決方法
1、溫控不當(dāng):調(diào)好柱溫,;
2,、流動相組分變化:防止變化(蒸發(fā)、反應(yīng)等),;
3,、色譜柱沒有平衡:在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱,。
(十一)二手液相譜圖保留時間不斷變化的原因和解決方法
1、流速變化:重新設(shè)定流速,;
2,、泵中有氣泡:從泵中除去氣泡;
3,、流動相選擇不恰當(dāng):更換合適的流動相,;選擇合適的混合流動相。
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