四極桿是更好的質量分析器,,三重四極桿質譜作為售價數(shù)倍于普通GCMS或LCMS更高的產品,已經大量進入了我國商檢,、質檢和研究單位,。毋庸置疑,三重四極桿是定量的上佳之選,,在定量方面有絕大大的優(yōu)勢,,但是在高分辨、多級串級質譜等定性方面優(yōu)勢較弱,。
很多國外的實驗室都采用裝備數(shù)臺Q/Q/Q并配備一臺離子阱或者QTOF儀器,,以彌補定性能力的不足。
三重四極桿質譜基礎知識
1,、其實是三重六極桿,?
三重四極桿也叫做Q/Q/Q質譜。
一個四極桿根據(jù)設定的質合比范圍掃描和選擇所需的離子,。
二個四極桿,,也稱碰撞池,用于聚集和傳送離子,。在選擇離子飛行的途中,,引入碰撞氣體氮氣,
第三個四極桿用于分析在碰撞池中產生的碎片離子,。
簡單的說:Q1 可以篩選母離子 mz1;Q2 通過碰撞碎裂打碎離子,,形成碎片離子峰;Q3 篩選子離子,,定量子離子碎片強度 mz2,。
實際上,碰撞池采用了六極桿的設計,,擁有更好的聚焦及傳輸功能,,四極桿就被淘汰了,但還沿用三重四極桿的名稱,。
2,、每個四極桿分析器工作方式主要有三種 :
全離子通過 (TTI)、掃描 (SC A N ),、選擇離子監(jiān)測(SIM ),。
將兩個四極桿在空間上串聯(lián)起來,主要的工作方式有全掃描(Scan),選擇離子監(jiān)測(SIM),,子離子掃 描(Product Ion Scan),,母離子掃描(Precur—sor Ion Scan),多重反應監(jiān)測(MRM),。
三重四極桿質譜是如何定量的,?
三重四極桿通過離子打碎獲得特異性子離子,子離子在通過Q3后時在接收器上轉化為電信號,,反映到分析軟件就是離子強度圖,。在一定線性范圍下,分析物濃度越高,,打到接收器上的離子就越多,,信號越強,這是定量的基礎,。
此外在定量時可以選擇用峰高或峰面積定量,,一般選用峰面積定量準確。因為是定量,,所以需標準曲線,,原理與高效液相類似。一般多用內標法定量,,以排除質譜重現(xiàn)性和樣品處理造成的影響,。
那么,隨著設置離子對越多,,如何能保證定量準確呢,?四極桿對于離子的選擇性通過是交替進行的,在所有離子通道之間快速切換,。隨著設置離子對數(shù)量的增加,,每個離子所占用的檢測時間縮短,這會影響到其檢測靈敏度,,但是只要實際樣品和標準溶液所采用的分析方法一致,,定量的準確性理論上是不受影響的。
三重四極桿質譜環(huán)境條件
環(huán)境要求實驗室溫度為 15~27℃,,溫度變化<3℃/h ,,相對濕度< 80% ,質譜儀在工作時,,電路板及分子蝸輪泵會產生大量的熱量,,要求室溫不大于27℃。長期處于高溫下運行,,會導致電路板損壞及降低泵的使用壽命。儀器需要的氣體有 3 處,分別是霧化氣,,干燥氣和碰撞氣,。安捷倫三重四極桿質譜儀都使用氮氣 ,waters ,、島津質譜儀碰撞氣使用氬氣,,霧化氣和干燥器使用氮氣。作為霧化氣和干燥氣的使用的氮氣,,要求純度大于 95.5 % ,。
單四極桿與三重四極桿質譜有何不同?
三重的可以做MS-MS, 如果只從聚焦來講三重其實是個雙四極桿,,而單的不能做MS-MS.沒有只有雙四極桿的儀器,, 至少現(xiàn)在還沒有。單四極桿也可以實驗MS-MS,,可以通過源內CID實現(xiàn),。
單四極桿碎片較少,定性信息不如三重四極桿質譜,。三重四極桿,,實際上起碎片作用的是兩重,中間那個是起碰撞誘導作用,。它能產生較多的碎片,,定性比單桿要好。而且相對于離子阱而言,,雖然定性要差一點,,但定量能力超過離子阱。
兩種儀器滿足了不同類別的需求,,各自有服務領域,。比如化合物合成,定性,,用SQ足以,,另有紫外、核磁輔助,。做個簡單組分定量,,面積歸一法,DAD配SQ,,就滿足需求,。單四極桿并不是毫無用武之地。
總的來說,,單級四極桿能夠滿足日常檢測需求,,三重四極桿成本更高,,反而使用效率很低,據(jù)了解,,多數(shù)企業(yè)實驗室購買了三重四極桿,,卻只用到了MRM掃描模式的功能,其他就連基本的母離子掃描,,子離子掃描,,中性丟失等功能,也很少用到,。
雖然三重四極桿是定量的上佳之選,,但相對于飛行時間質譜,離子阱質譜,,磁質譜,,三重四極桿質譜靈敏度不高,主要還是應用于與液相色譜聯(lián)用(LC—MS),,用作定量分析,。將液相色譜高效的在線分離能力與質譜的高選擇性、高靈敏度的檢測能力相結合,,彌補了傳統(tǒng)液相檢測器的不足,,可以同時得到化合物的保留時間、分子量及特征結構碎片等豐富的信息,,是組分復雜樣品和微量/痕量樣品分離分析更有力的研究手段,。
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