Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC標(biāo)記的重組人Annexin V來檢測細(xì)胞凋亡時出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰絲氨酸（phosphatidylserine，簡稱PS）的一種細(xì)胞凋亡檢測試劑盒?？梢允褂昧魇郊?xì)胞儀,、熒光顯微鏡或其它熒光 檢測設(shè)備進行檢測,。

檢測原理

       凋亡早期,，細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸（PS）會從膜內(nèi)翻到膜外，這是凋亡的一個典型特征,，細(xì)胞凋亡處于早期階段時,，僅有PS外翻，而細(xì)胞膜仍然完整,，隨著凋亡進程的推移,，細(xì)胞除了PS外翻以外，細(xì)胞膜通透性會改變,，可以簡單的理解成凋亡后期,，細(xì)胞膜有穿孔的現(xiàn)象。

       Annexin V凋亡檢測試劑盒一般包含3個組分：兩個染料和一個為Annexin V標(biāo)記提供鈣離子環(huán)境的Binding Buffer,。Annexin V本質(zhì)是一個在鈣離子環(huán)境下,，能夠與磷脂酰絲氨酸高度特異性結(jié)合的膜聯(lián)蛋白，通過在該蛋白上標(biāo)記的熒光基團，來標(biāo)記凋亡細(xì)胞,，然后再搭配只能夠進入受損細(xì)胞膜的核酸染料,，就可以達到區(qū)分各階段細(xì)胞的目的了。

細(xì)胞分為三類：一是無PS外翻,，也沒有細(xì)胞膜破裂的健康細(xì)胞（兩個染料都染不上）,，二是處于早期凋亡，有PS外翻但是細(xì)胞膜完好的細(xì)胞（可以染上Annexin V-FITC,，不能染上PI），三是處于晚期凋亡階段,，既存在PS外翻,，也存在細(xì)胞膜破裂的晚期凋亡細(xì)胞（兩種染料均可染上）。染完色后通過流式細(xì)胞儀,，就能夠?qū)?xì)胞群體進行定量和分析了,。

Bioss Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒介紹

產(chǎn)品特點

Bioss自主研發(fā)產(chǎn)品，染色效果優(yōu)于國際高價格品牌,！
調(diào)亡細(xì)胞群分群清晰,，且細(xì)胞群集中！
不同檢測方案,，信號更強更靈敏,！
操作簡便，省時又省力,，加入PI 后5min可直接上機檢測,！

BA00101檢測數(shù)據(jù)

A. 流式細(xì)胞儀分析：

AF488最大激發(fā)波長為488nm，最大發(fā)射波長519nm,；PI-DNA復(fù)合物的最大激發(fā)波長為 535nm,， 最大發(fā)射波長為615nm。用CellQuest等軟件進行分析,，繪制散點圖,，AF488為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo),。典型實驗中的細(xì)胞可以分成三個亞群,，活細(xì)胞僅有很低強度的自發(fā)熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,，晚期凋亡細(xì)胞有綠色及紅色熒光雙重染色,。

B. 熒光顯微鏡分析：

懸浮細(xì)胞：滴一滴用 AnnexinV-AF488/PI 雙染的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞,。

貼壁細(xì)胞：可直接用蓋玻片培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,。

在熒光顯微鏡下用雙色濾光片觀察。早期凋亡細(xì)胞僅有綠色熒光信號，晚期凋亡細(xì)胞有綠色及紅色熒光雙重染色,。

Annexin V單染(左),、PI單染(中)、Annexin V/PI雙染(右)

Bioss產(chǎn)品與國際品牌檢測結(jié)果對比示例

Protocol:

Jurkat 細(xì)胞生長至對數(shù)生長期時,，分別經(jīng)過紫外誘導(dǎo)0秒,、15秒、30秒后,，繼續(xù)培養(yǎng)4h后加入Annexin V-FITC / PI檢測,。

Result：

Bioss

e品牌

k品牌

相關(guān)產(chǎn)品文獻展示