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蘇木素-伊紅染色試劑盒的使用說明
蘇木素是一種有機物,，化學式為C16H14O6,，為褐色結晶粉末,，用作核和染色質的染色劑。用于光度法測定釩,、鋁,、錫(IV)、氟,、鈮,、鉭等。
蘇木素和伊紅在組織學上被經(jīng)常使用,，與碘液不同,，這是一種染色劑。其他常用的含有蘇木素的染色劑有磷鎢酸蘇木素染色劑,，也就是磷鎢酸與蘇木素的混合物,。蘇木素染色劑經(jīng)常為組織的研究使用。 明礬和三價鐵鹽常常被用作媒染劑,，展示核和細胞質結構,。這些媒染劑的原理都是形成媒染劑-染料-組織復合體，從而顯示顏色,。使用的鹽不同顏色也不同： 當用鐵鹽呈現(xiàn)深藍色顏色沉淀,，用鋁鹽通常顯示藍白色。下面分別介紹鋁蘇木素溶液和鐵蘇木素溶液。
蘇木素-伊紅染色試劑盒使用說明：
1. 樣品處理
a) 對于石蠟切片：二甲苯中脫蠟5-10分鐘,，換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘,，無水乙醇5分鐘,，90%乙醇2分鐘，70%乙醇2分鐘,，蒸餾水2分鐘,。
b) 對于冰凍切片：經(jīng)固定的切片置蒸餾水2分鐘。
c) 對于培養(yǎng)細胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,，蒸餾水洗滌2分鐘,，換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘,。
2. 蘇木素-伊紅染色
a) 對于上述處理好的樣品,，用蘇木素染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結果和要求調(diào)整時間)，回收染色液后,，用自來水沖洗去除殘留的染色液,，
b) 藍化和分色：用自來水沖洗，待切片變成藍色后,，再用含0.5～1%鹽酸的70%酒精溶液進行分色,，脫去多余的染料(因為蘇木精染色后，細胞核著色較深,，細胞質及結締組織纖維等亦稍著色,，影響下步染色及觀察)。然后再用自來水沖洗,，使之藍化,，需5～10分鐘。
c) 伊紅染色：切片用蒸餾水浸洗后,，放入1%伊紅水溶液,，浸染5～10分鐘。
d) 脫水：將切片用蒸餾水洗去附在載玻片上的染液后,，經(jīng)70%,、80%、90%酒精分色及脫水,，再經(jīng)95%酒精和2次*脫水,，每級一般為2分鐘。
e) 透明：切片入二甲苯2次,，每次2分鐘,。
f) 封固：從二甲苯中取出切片，在切片的組織上滴加適量樹膠,，上面再加一蓋玻片,， 使樹膠布滿于蓋玻片與載玻片之間的間隙,，封固即告完成。將封好的切片標本放入烤箱,，待蓋玻片粘著牢固后,，即獲得可供長期觀察和保存的H·E染色標本。
3. 進行其它染色
如果進行免疫熒光染色,，伊紅染色液染色后,，70%乙醇洗滌2次，每次2分鐘,，再用PBS或生理鹽水,、TBS、TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘,，然后就可以進行免疫熒光染色或其它的染色,。