一,、核酸內(nèi)切酶(endonuclease)在核酸水解酶中，為可水解分子鏈內(nèi)部磷酸二酯鍵生成寡核苷酸的酶，與核酸外切酶相對(duì)應(yīng),。從對(duì)底物的特異性來看,，可分為DNaseⅠ、DNaseⅡ等分解DNA的酶,；RNase,、RNaseT1等分解RNA的酶。一般來說,，大都不具堿基特異性,，但也有諸如脾臟RNase、RNaseT1等或限制性內(nèi)切酶那種能夠識(shí)別并切斷特定的堿基或堿基序列的酶,。
二,、原理作用：
(1)限制性酶切反應(yīng)速度與底物的性質(zhì)有很大的關(guān)系，底物的單雙鏈結(jié)構(gòu),、分子的構(gòu)型,、DNA鏈中酶識(shí)別位點(diǎn)的數(shù)目以及位點(diǎn)附近的序列等都影響著酶的催化反應(yīng)。共價(jià)閉合環(huán)(超螺旋構(gòu)型)DNA比其相應(yīng)的線性分子的酶解作用要慢,，要使超螺旋構(gòu)型DNA降解,，需要的酶量就大。
(2)對(duì)于DNA-RNA雜合雙鏈的酶切作用,，Molloy等用EcoRI等8種酶切時(shí),，結(jié)果其DNA鏈可被切割，但酶用量比雙鏈DNA大20-50倍,。部分限制性酶還可切割單鏈DNA,，如HaeⅢ等。
三,、分類：
(1)Ⅰ型限制酶為復(fù)合功能酶，具有限制-修飾兩種功能,，但在DNA鏈上沒有固定的切割位點(diǎn),，一般在離切割位點(diǎn)1kb到幾kb的地方隨機(jī)切割，不產(chǎn)生特異性片段,。
(2)Ⅲ型酶與Ⅰ型酶基本相似,，不同的是Ⅲ型酶有特異性的切割位點(diǎn)，但這兩類酶對(duì)DNA酶切分析的意義不大,，通常所說的限制性內(nèi)切酶是指Ⅱ型酶,，它能夠識(shí)別與切割DNA鏈上的特定的核苷酸順序，產(chǎn)生特異性的DNA片段,。
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