凍存液302-14681的細(xì)胞凍存步驟:
1,、常規(guī)方法收集對數(shù)期的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞于試管中。
2,、根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細(xì)胞數(shù),。
3、將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中,,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,,棄去離心管中的上清液。
4,、加入適量的本凍存液于離心管中,。輕柔地混勻細(xì)胞,制成細(xì)胞混合液,。
5,、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中。
6,、直接將分裝好的細(xì)胞凍存管置于溫冰箱中,,可長期保存。
7,、若需液氮長期保存,,需先置其中至少一天后方可轉(zhuǎn)至液氮罐中。
凍存液302-14681的凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
1、從冰箱中取出凍存的細(xì)胞,,立即置于水浴槽中快速解凍,。
2、待凍存管中的細(xì)胞混合液*融化后,,立即加入細(xì)胞培養(yǎng)基于凍存管中與細(xì)胞混合,,將其中的混合液移至含有該細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中,收集凍存細(xì)胞沉淀,,移去上清液(注意勿將細(xì)胞沉淀倒掉),。
3、加入適量的新鮮培養(yǎng)基,,使用移液管緩緩加入細(xì)胞沉淀中,,輕柔混勻,將混勻好的細(xì)胞移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中,。
4,、鏡檢觀察,待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后可進行其他研究或者培養(yǎng)處理,。
凍存液302-14681的注意事項:
需在超凈臺內(nèi)使用,,以避免雜菌污染。
需和細(xì)菌混勻,,否則細(xì)菌凍存液無法起到在低溫冷凍條件下對細(xì)菌的保護作用,。
對數(shù)期細(xì)菌凍存效果,但非對數(shù)期的或不是新鮮培養(yǎng)的細(xì)菌也可以用本細(xì)菌凍存液冷凍保存,。
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