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凍存液302-14681的細(xì)胞凍存步驟和凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟

閱讀:1568      發(fā)布時(shí)間:2022-8-13
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   凍存液302-14681的細(xì)胞凍存步驟:
  1、常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞于試管中,。
 
  2,、根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細(xì)胞數(shù)。
 
  3,、將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中,,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,棄去離心管中的上清液,。
 
  4,、加入適量的本凍存液于離心管中。輕柔地混勻細(xì)胞,,制成細(xì)胞混合液,。
 
  5、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中,。
 
  6,、直接將分裝好的細(xì)胞凍存管置于溫冰箱中,,可長(zhǎng)期保存。
 
  7,、若需液氮長(zhǎng)期保存,,需先置其中至少一天后方可轉(zhuǎn)至液氮罐中。
 
  凍存液302-14681的凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
  1,、從冰箱中取出凍存的細(xì)胞,,立即置于水浴槽中快速解凍。
 
  2,、待凍存管中的細(xì)胞混合液*融化后,,立即加入細(xì)胞培養(yǎng)基于凍存管中與細(xì)胞混合,將其中的混合液移至含有該細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中,,收集凍存細(xì)胞沉淀,,移去上清液(注意勿將細(xì)胞沉淀倒掉)。
 
  3,、加入適量的新鮮培養(yǎng)基,,使用移液管緩緩加入細(xì)胞沉淀中,輕柔混勻,,將混勻好的細(xì)胞移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中,。
 
  4、鏡檢觀察,,待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后可進(jìn)行其他研究或者培養(yǎng)處理,。
 
  凍存液302-14681的注意事項(xiàng):
  需在超凈臺(tái)內(nèi)使用,以避免雜菌污染,。
 
  需和細(xì)菌混勻,,否則細(xì)菌凍存液無(wú)法起到在低溫冷凍條件下對(duì)細(xì)菌的保護(hù)作用。
 
  對(duì)數(shù)期細(xì)菌凍存效果,,但非對(duì)數(shù)期的或不是新鮮培養(yǎng)的細(xì)菌也可以用本細(xì)菌凍存液冷凍保存,。

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