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ViralStars LP110 慢病毒包裝試劑盒
Lentivirus Packaging Kit
ViralStars LP110 慢病毒包裝試劑盒
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120 nm,,呈二十面體對稱結(jié)構(gòu),、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細胞的類型),,再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,,最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶),。
慢病毒表達載體包含了包裝,、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,。慢病毒包裝質(zhì)??商峁?/span>包裝重組慢病毒載體所需的所有輔助蛋白。為產(chǎn)生高滴度的病毒顆粒,,需要利用表達載體和包裝質(zhì)粒同時共轉(zhuǎn)染細胞,,在細胞中進行病毒包裝,包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養(yǎng)基中,,離心取得上清液后,,可以直接或濃縮后用于宿主細胞的感染,。
慢病毒感染細胞的第一步是通過包膜蛋白與細胞表面受體結(jié)合。慢病毒與宿主細胞膜融合后釋放結(jié)構(gòu)蛋白,、酶蛋白和病毒核心,。病毒RNA在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下逆轉(zhuǎn)錄并與整合酶形成整合前復合物。整合前復合物進入細胞核后,,整合酶催化其整合至宿主基因組,。整合后的DNA轉(zhuǎn)錄為mRNA,回到細胞漿中,,表達目的蛋白或產(chǎn)生RNAi干擾,。
ViralStarsTM LP Lentivirus Packaging Kit慢病毒包裝試劑盒屬于第二代慢病毒包裝體系,同時可兼容第二代和第三代慢病毒包裝質(zhì)粒,。慢病毒中的毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源性目的基因所取代,,屬于假型病毒,即產(chǎn)生的慢病毒感染目的細胞后不會再感染其他細胞,,也不會利用宿主細胞產(chǎn)生新的病毒顆粒,。ViralStarsTM LP Lentivirus Packaging Kit包裝的慢病毒具有感染效率高、感染譜廣等特點,,可實現(xiàn)外源基因在宿主細胞中的穩(wěn)定持續(xù)表達,。經(jīng)該試劑盒包裝獲得的對照質(zhì)粒病毒滴度可達108 TU/mL。
ViralStarsTM LP Lentivirus Packaging Kit慢病毒包裝試劑盒包含如下組分:
(1) 優(yōu)化配比的慢病毒包裝輔助質(zhì)?;旌衔铮?/span>Package Plasmid Mix),,經(jīng)過設計調(diào)整,可兼容大多數(shù)慢病毒表達載體,,確保將重組子包裝成具有高感染率的慢病毒顆粒,。
(2) 表達GFP 和 Puro標記的對照質(zhì)粒(Control Plasmid),便于觀察病毒包裝效率及測定病毒滴度,。
適用范圍
兼容大多數(shù)慢病毒表達載體,,經(jīng)過設計及優(yōu)化配比,確保將重組子包裝成具有高感染率的慢病毒顆粒,,同時防止病毒的自我復制,。
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