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湖南立譜沃生物科技有限公司資料大小
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1452次WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)
CatalogNumber:ED510
01/產(chǎn)品概述:
立譜沃生物的WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)ED510,,即WesternBlotRapidTransferBuffer(20X),,是一種20倍濃縮的安全無毒害的用于WesternBlot實(shí)驗(yàn)的快速濕轉(zhuǎn)緩沖液。本產(chǎn)品采用全新的快速轉(zhuǎn)印配方,,15-30min即可高效,、快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。本產(chǎn)品為20倍濃縮(20X)溶液,,使用前需要用適當(dāng)水和乙醇稀釋至1X,。配制過程中,可用無水乙醇替代甲醇,,無需使用劇毒的甲醇等試劑,,安全無毒害。轉(zhuǎn)膜全程產(chǎn)熱小,,無需外置冰浴,。
02/產(chǎn)品組分
組分 | ED510 |
Western Blot Rapid Transfer Buffer (20X) | 500 mL |
03/保存條件:常溫運(yùn)輸。室溫干燥處保存,,有效期12個(gè)月,。
04/Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X) ED510產(chǎn)品特點(diǎn)
1.轉(zhuǎn)印快速、高效——500mA恒流轉(zhuǎn)膜15-20分鐘或400mA恒流轉(zhuǎn)膜約20-30分鐘,,即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉(zhuǎn)移至印跡膜上,,轉(zhuǎn)膜效果好。
2.無需外置冰浴,,僅使用內(nèi)置冰盒即可——轉(zhuǎn)膜過程產(chǎn)熱非常小,,無需外置冰浴,減少蛋白損失,。相同的條件下使用傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液更容易導(dǎo)致過度發(fā)熱,,而在發(fā)熱程度相似的情況下傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液需要轉(zhuǎn)膜更長(zhǎng)時(shí)間,。
3.使用安全——可用無水乙醇替代甲醇,選擇靈活,,可避免使用有毒的甲醇等試劑,。
05/適用范圍
WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)適用于WesternBlot濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)膜。兼容各種常見凝膠,,例如Laemmli膠,、預(yù)制膠、FastPAGE,、Bis-Tris膠等,。
06/使用說明
一、WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(1X)1000mL的配制方法:
取WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)50mL加入850mL超純水中,,加入100mL無水甲醇(或無水乙醇),,混勻,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>
二,、Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X) ED510參考轉(zhuǎn)膜條件:
根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件及儀器的不同,,轉(zhuǎn)膜條件會(huì)有差別。通常條件下,,轉(zhuǎn)膜電流可設(shè)置為電泳儀允許的最大電流,。具體轉(zhuǎn)膜條件可根據(jù)電泳儀電流限定、凝膠厚度,、分離膠濃度,、目的蛋白分子量做出適當(dāng)調(diào)整。參考轉(zhuǎn)膜條件如下:
1.梯度膠
濃度4%~15%,,厚度0.75mm,,恒流400mA,30min以內(nèi)所有條帶均可完成轉(zhuǎn)膜,。
2.普通PAGE膠
轉(zhuǎn)膜效率與分離膠濃度及厚度有關(guān),,對(duì)于各濃度1.0mm凝膠,采用恒流400mA,,按如下時(shí)長(zhǎng)即可將150kDa以下蛋白轉(zhuǎn)印*,,若蛋白分子量大于150kDa,需延長(zhǎng)轉(zhuǎn)膜時(shí)間5-10min,。
分離膠濃度 | 6% | 7.5% | 10% | 12.5% |
推薦轉(zhuǎn)膜時(shí)間 | 20 min | 25 min | 30 min | 35 min |
ØPAGE膠厚度越厚,,轉(zhuǎn)膜效率越低。對(duì)于厚度1.5mm的凝膠,,可將上表推薦的轉(zhuǎn)膜時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)5-10min,。
07/WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)ED510注意事項(xiàng)
1.PVDF膜使用前需用無水甲醇潤(rùn)濕30秒以上進(jìn)行活化。
2.轉(zhuǎn)膜液稀釋為1x后請(qǐng)盡快使用,應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間存放于室溫,,短期內(nèi)保存建議放置于4℃冰箱,。
3.轉(zhuǎn)膜時(shí),如果出現(xiàn)報(bào)錯(cuò)而停止,,需要根據(jù)情況查看是否是電壓或電流過載,、轉(zhuǎn)膜液過多或過少、轉(zhuǎn)膜槽短路或斷路等異常情況,。
4.回收的轉(zhuǎn)膜液可重復(fù)使用1-2次,但為取得更好的轉(zhuǎn)膜效果,,不建議多次重復(fù)使用,,以免影響轉(zhuǎn)膜效率。
5.為了您的健康安全,,請(qǐng)規(guī)范操作,,穿戴實(shí)驗(yàn)服與手套開展實(shí)驗(yàn)。
6.本產(chǎn)品僅供科研使用,,請(qǐng)勿用于臨床診斷及治療,。
08/其他相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Western Blot CBB Protein Safe Stain Solution (Decolorization Free, 1X) | ED410-1 | 100 mL |
ED410-5 | 500 mL | |
Western Blot Rapid Blocking Buffer (Protein Free, 1X) | ED610-1 | 100 mL |
ED610-5 | 500 mL | |
Western Blot Stripping Buffer (1X) | ED710-1 | 100 mL |
ED710-5 | 500 mL | |
Western Blot Primary Antibody Dilution Buffer (1X) | ED810-1 | 100 mL |
ED810-5 | 500 mL | |
Western Blot Ultra Sensitive ECL Chemiluminescent Substrate Kit | ED910-1 | 100 mL |
ED910-5 | 500 mL |
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