Cell Freezing Medium (1x)

Catalog Number：PZ110R

01/產(chǎn)品概述

　　細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝,，以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存的一種技術(shù)，是細(xì)胞長(zhǎng)期保存的重要手段。細(xì)胞凍存液通過(guò)冷凍保護(hù)劑在凍存過(guò)程中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行保護(hù),，以減少或防止冷凍冰晶對(duì)細(xì)胞造成的損傷,。

　　LeapWal無(wú)血清細(xì)胞凍存液PZ110R是立譜沃生物自主研發(fā)的一款無(wú)血清、無(wú)需程序降溫的細(xì)胞凍存液,，廣泛適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存,。該凍存液特別優(yōu)化的配方含有雙重保護(hù)細(xì)胞的成份，從細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外同時(shí)保護(hù)細(xì)胞免受凍存時(shí)冰晶的損傷,，大大提高了細(xì)胞的復(fù)蘇率和活力,，可用于細(xì)胞長(zhǎng)期保存。該產(chǎn)品配方成分明確,，不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白,，不含血清，可減少各類(lèi)細(xì)菌,、病毒和支原體等污染,，保證凍存細(xì)胞的安全。

　　LeapWal 無(wú)血清細(xì)胞凍存液 PZ110R與傳統(tǒng)凍存液相比,，本產(chǎn)品不僅可以避免使用血清,，降低血清中未知成分和病毒等感染物質(zhì)給凍存帶來(lái)的影響與風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí),，可省去繁瑣費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程,，細(xì)胞可重懸于本產(chǎn)品后直接置于-80℃冰箱長(zhǎng)期保存，或次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個(gè)凍存過(guò)程,。

02/產(chǎn)品組分

03/保存條件

冰袋（wetice）運(yùn)輸,。4℃保存，有效期6個(gè)月,。若長(zhǎng)期不用,，可-30℃至-10℃保存，有效期24個(gè)月,。

04/產(chǎn)品特點(diǎn)

　　1.即用型細(xì)胞凍存液,，無(wú)需程序降溫，直接凍存于-80℃冰箱,，長(zhǎng)期保存（>5年）

　　2.安全性高,，無(wú)動(dòng)物源性蛋白，不含血清,，病毒、病菌和支原體等污染可能性低

　　3.凍存細(xì)胞復(fù)蘇率高達(dá)90%以上,，細(xì)胞活力好

　　4.成分明確,，極大降低批次間差異

05/實(shí)驗(yàn)流程概要

06/實(shí)驗(yàn)步驟

一：細(xì)胞凍存步驟

　　1.選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，按照常規(guī)方法收集貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于離心管中。

　　2.1000rpm-2000rpm,，離心5分鐘,，收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀，棄上清液,。

　　3.加入適量4℃預(yù)冷的LeapWalCellFreezingMedium(1x)重懸細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液。

　　?按照細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存液的量,，推薦凍存密度：1x106至5x106cells/mL,。

　　4.將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中，建議每管1mL或1.5mL,。

　　5.直接將細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中,，可長(zhǎng)期冷凍保存。如果想放入液氮中長(zhǎng)期保存,，需先放入-80℃冰箱至少12小時(shí),，方可移至液氮罐中長(zhǎng)期保存。

二：凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟

　　1.在15mL離心管中加入5-10mL平衡至室溫的*培養(yǎng)基,。

　　2.從-80℃冰箱/液氮中取出凍存的細(xì)胞,，立即放入37℃水浴鍋或其他細(xì)胞復(fù)蘇設(shè)備中，迅速解凍,。

　　3.將凍存管中的細(xì)胞懸液逐滴轉(zhuǎn)移至預(yù)先準(zhǔn)備好的含*培養(yǎng)基的離心管中,，1000rpm-1500rpm，離心5分鐘,，收集細(xì)胞沉淀,，棄上清（操作時(shí)小心，切勿將細(xì)胞沉淀移去）,。

　　4.加入適量平衡至室溫的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，接種到事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中，輕輕搖晃培養(yǎng)容器,，使細(xì)胞分布均勻,。

　　5.鏡檢細(xì)胞后，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng),。培養(yǎng)5-24h后,，觀察細(xì)胞狀態(tài)，可視情況更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液,。

07/適用范圍

　　LeapWal 無(wú)血清細(xì)胞凍存液 PZ110R 廣泛適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存,。無(wú)需程序降溫，-80℃可長(zhǎng)期保存（>5年）,，細(xì)胞存活率在90%以上,。

08/質(zhì)量控制

　　LeapWal無(wú)血清細(xì)胞凍存液均已通過(guò)嚴(yán)格的內(nèi)毒素,、滲透壓、pH測(cè)試和無(wú)菌檢測(cè)（細(xì)菌,、真菌和支原體檢測(cè)）,。

09/注意事項(xiàng)

　　1.若長(zhǎng)期不用，本產(chǎn)品可-30℃至-10℃保存,，再次使用時(shí),，請(qǐng)?jiān)?-8℃或室溫（22-25℃，不超過(guò)4小時(shí)）融化LeapWal Cell  Freezing Medium,，避免反復(fù)凍融,；

　　2.使用LeapWal  Cell Freezing Medium凍存細(xì)胞后，應(yīng)盡量減少凍存細(xì)胞在外存放時(shí)間,，盡快移入-80℃超低溫冰箱長(zhǎng)期保存,；

　　3.Leap Wal Cell Freezing Medium含有DMSO，部分對(duì)DMSO敏感的細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞或干細(xì)胞凍存,，建議使用本產(chǎn)品對(duì)其進(jìn)行試驗(yàn)性?xún)龃妗?fù)蘇,、培養(yǎng),，確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存；

　　4.該產(chǎn)品在室溫條件下放置的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),，以免影響凍存效率,；

　　5.免責(zé)聲明:本公司將不為任何不正當(dāng)使用此產(chǎn)品所發(fā)生的意外負(fù)責(zé)；

　　6.為了您的健康安全,，請(qǐng)規(guī)范操作,，穿戴實(shí)驗(yàn)服與手套開(kāi)展實(shí)驗(yàn)；

　　7.本產(chǎn)品僅供科研使用,，請(qǐng)勿用于臨床診斷及治療,。

10/實(shí)驗(yàn)案例分析

　　1.選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的四種細(xì)胞，按照常規(guī)方法收集細(xì)胞于離心管中,。

　　2.1000rpm,，離心5分鐘，收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,，棄上清液,。

　　3.加入適量4℃預(yù)冷的LeapWalCellFreezingMedium、T公司凍存液,、X公司凍存液分別重懸細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液。凍存密度為1x106cells/mL,。

　　4.將細(xì)胞懸液分裝至已標(biāo)記的凍存管中,，每管1mL,，放入-80℃冰箱中，冷凍保存,。

　　5.凍存6個(gè)月后，進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,，對(duì)復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)染色,，統(tǒng)計(jì)細(xì)胞存活率。

圖2: 細(xì)胞凍存6個(gè)月后復(fù)蘇,，對(duì)復(fù)蘇后的細(xì)胞進(jìn)行臺(tái)盼藍(lán)染色,，統(tǒng)計(jì)細(xì)胞存活率

11/其他相關(guān)產(chǎn)品