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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 科研實驗,科研實驗 |
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品牌 | 化邦 | 運輸 | 順豐包郵 |
保存 | -20℃ | 有效期 | 1年 |
品牌:化邦
產品規(guī)格:50T
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
Cortexalbiziae合歡皮探針法PCR鑒定試劑盒
注意事項:
1.基礎程序,。
2.擴增溫度和延伸溫度,。
3.反應時間。
4.循環(huán)次數,。
5.片PCR 反應液的配制,。
6.PCR技術的基本原理。
7.PCR的反應動力學,。
8.PCR擴增產物,。
9.PCR反應體系與反應條件。
Cortexalbiziae合歡皮探針法PCR鑒定試劑盒
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,,常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC*隨機分布,,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,,避免兩條引物間互補,,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,,產生非特異的擴增條帶,。
⑤引物3'端的堿基,,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點,, 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,,以*引物量產生所需要的結果為好,,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
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