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TiYO™ 自體熒光淬滅系統(tǒng)解惑,助您更快上手操作
TiYOTM 采用光漂白LED技術(shù),,強(qiáng)力淬滅自體熒光,,大幅提高信噪比,呈現(xiàn)清晰無比的熒光圖像,。特別適用于處理高度自發(fā)熒光的樣本,。在使用TiYOTM時,您是否對于如何操作它還有很多的疑問,?無從下手,?
當(dāng)遇到操作問題,如何解決呢,?
Q:TiYOTM是在染色前還是染色后使用,?
A:在染色前使用TiYOTM
Q:是否只需在裝滿PBS的托盤中放置好組織切片就可以用TiYOTM進(jìn)行淬滅?
A:對于自體熒光較弱的樣品,,只需將其插入TiYOTM就能獲得淬滅效果,。若要獲得更充分的淬滅效果,我們建議先在室溫下用3%過氧化氫/甲醇預(yù)處理10min,,PBS沖洗5min,,再進(jìn)行淬滅操作。
Q:TiYOTM可以用于活細(xì)胞嗎,?
A:不可以,。活細(xì)胞會受到TiYOTM的強(qiáng)LED照射,,光刺激會導(dǎo)致細(xì)胞損傷,,細(xì)胞即使未死亡也會受到影響,。我們建議使用經(jīng)過多聚甲醛(PFA)、福爾馬林等固定后的樣品,。
Q:人腦樣品進(jìn)行2h淬滅后,,會出現(xiàn)管狀信號。有什么解決辦法嗎,?
A:對于腦和肝組織,,如果條件允許,推薦采用灌注固定的方法,。此外,,血細(xì)胞會發(fā)出很強(qiáng)的自體熒光,所以就排出血液而言,,灌注固定是個很好的方法,。如果仍有血細(xì)胞殘留,建議在灌注固定液之前先用含肝素的PBS對組織進(jìn)行一次回流沖洗,。成功進(jìn)行灌注固定的關(guān)鍵在于要保持固定液處于低溫狀態(tài),。
Q:可以使用表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)或紅色熒光蛋白(mCherry)的樣品嗎?
A:不僅自體熒光,,像GFP或mCherry這樣的熒光也會被淬滅,。如果您想使用表達(dá)GFP或mCherry的樣品,在淬滅后可以通過抗體染色的方法來檢測GFP或mCherry,,不過這樣做可能會比較耗時,。
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