細胞電融合儀是利用高電壓電脈沖實現(xiàn)細胞融合的生物實驗設備,。細胞融合技術在生物醫(yī)學研究和應用領域具有廣泛的用途,,如生產(chǎn)單克隆抗體、研究細胞分化,、制備雜交瘤細胞等,。
基本原理:細胞電融合儀通過施加短暫的高強度電脈沖,導致細胞膜出現(xiàn)可逆的微孔,,從而誘導細胞融合,。當細胞置于非常高的電場中,細胞膜變得具有通透性,,允許外界分子擴散進細胞內(nèi),,這一現(xiàn)象稱為電穿孔或電融合。
操作方法:在實驗中,,將制備的游離細胞或原生質(zhì)體置于電融合室中,,然后在高頻交流電場的作用下,細胞被極化成為偶極子,,并造成細胞之間相互連接,。控制高頻交流電壓的幅值和作用時間,,使兩細胞處于點接觸狀態(tài),,再施加方波脈沖刺激,,由于電脈沖的瞬間作用,,可擊破兩細胞接觸點部位的質(zhì)膜,促使細胞融合,。
融合過程:細胞融合過程包括質(zhì)膜的連接與融合,、胞質(zhì)合并,以及細胞核,、細胞器和酶等互成混合體系,。該過程可以通過施加合適的電脈沖來控制和實現(xiàn)。
融合分類:細胞融合可以分為同種細胞的融合和異種細胞的融合,后者也稱為體細胞雜交,。人工誘導細胞融合的方法包括生物法,、化學法和物理法。
融合變化:在細胞融合過程中,,出現(xiàn)的現(xiàn)象是細胞凝集,,隨后部分凝集細胞之間的膜發(fā)生粘連,并繼續(xù)發(fā)展形成多核細胞,,在培養(yǎng)過程中多核細胞進行核融合而成為單核的雜種細胞,。
融合劑:細胞融合可以使用不同的促融合劑,包括病毒促進細胞融合(如仙臺病毒),、化學融合劑(如聚乙二醇PEG等)和物理方法(如電融合)來人為地促使細胞融合,。
需要注意的是,細胞電融合儀在進行細胞電融合實驗時,,應適當選擇實驗參數(shù),,如電場強度、脈沖時長和頻率,,這些因素將直接影響融合效率及細胞存活率。同時,,實驗操作需在無菌條件下進行,,以避免污染風險。