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廣州市艾貝泰生物科技有限公司

直接碾壓——徑向?qū)游龉に嚺c傳統(tǒng)軸向工藝對標(biāo)數(shù)據(jù)公布

時間:2023-6-8 閱讀:449
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01
什么是徑向?qū)游黾夹g(shù),?


傳統(tǒng)的軸向流層析技術(shù)中,,其流體在柱內(nèi)從一端流向另一端,通常是柱上端往下端流動,,液流方向沿著中軸重力方向向下流動,。

而徑向?qū)游黾夹g(shù)不同于傳統(tǒng)的軸向流層析技術(shù),徑向流色譜柱流動相攜帶樣品沿徑向遷移,。徑向?qū)游鲋O(shè)計成了套筒狀,,即填料形狀不是傳統(tǒng)的柱狀,而是類似于甜甜圈的形狀,,層析柱包含內(nèi)外表面,,中間通道裝載填料。

通常,,徑向?qū)酉抵辛鲃酉鄰闹敳窟M入,,后通過管路分散至外擋板,后垂直與中軸徑向往內(nèi)擋板流動,,填料即裝載與內(nèi)外擋板之間,,如下圖所示:

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為了保持柱高及線流速不變,實現(xiàn)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)募兓?藝放?,,結(jié)合徑向及傳統(tǒng)軸向柱的特點設(shè)計的Wedge柱應(yīng)運而生,。輕松實現(xiàn)從實驗室規(guī)模的軸向柱到大規(guī)模的徑向柱的線性放大,。

另外,Wedge 柱實現(xiàn)了傳統(tǒng)軸向?qū)游?藝到徑向?藝的橋接,,免除了那些?試或中試使?傳統(tǒng)軸向?qū)游龉に?中試或?產(chǎn)想要使用徑向?qū)游龉に嚳蛻舻暮箢欀畱n,。

Wedge柱為更大規(guī)模徑向?qū)游鲋目s?模型,類似于切蛋糕,,?型徑向?qū)游鲋鶠榈案猓琖edge柱為切下來的??塊,。如下圖所示:

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02
徑向?qū)游龉に嚺c傳統(tǒng)軸向工藝的對標(biāo)數(shù)據(jù)




1)Superflo徑向?qū)游鲋c傳統(tǒng)軸向柱的層析效率比對

目前生物制品蛋白原液的工藝開發(fā)及生產(chǎn)中的層析柱柱高通常高于10cm, 個別友商甚至高達30cm, 同時填料常用瓊脂糖等軟膠填料,,當(dāng)層析設(shè)置較高線性流速、較短保留時間時通常會產(chǎn)生較高的系統(tǒng)反壓,,尤其是滿載上樣或者發(fā)酵上清性狀不佳時更甚,,容易超出一般軟膠耐受壓力0.3Mpa, 導(dǎo)致層析緩慢、效率低下,。

superflo徑向?qū)游鲋脑O(shè)計有效避免了過高的系統(tǒng)反壓,,可以大幅縮短保留時間、提升層析效率,,現(xiàn)將徑向柱與傳統(tǒng)軸向柱進行性能比對,。

實驗材料如下所示:

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本實驗中使用同一種填料裝填的不同層析柱,保持兩種柱子體積流速及保留時間一致,,使用超純水為流動相,,測試其在不同運行流速下的壓力情況,從而反應(yīng)運行效率,。

測試結(jié)果如下:

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目前層析工藝中所使用的保留時間通常介于5-10min, 本次實驗考察了2.2-50min保留時間內(nèi)徑向和軸向?qū)游龉に嚨倪\行效果,,表中可見,軸向工藝隨著保留時間的縮短壓力上升顯著高于徑向工藝,,保留時間2.2min時軸向工藝已經(jīng)超過了一般軟膠的耐受壓力0.3Mpa, 而徑向工藝仍然處于很低的反壓水平,。




2)Wedge層析柱與傳統(tǒng)軸向柱的層析效率比對

Wedge柱為superflo徑向柱的縮小模型,通常用于工藝開發(fā)中,,最小規(guī)格柱體積為5ml, 本次對比測試采用20ml wedge柱進行,。

實驗材料如下所示:

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本實驗中使用同一種填料裝填的不同層析柱,保持兩種柱子線性流速及保留時間一致,,使用超純水為流動相,,測試其在不同運行流速下的壓力情況,從而反應(yīng)運行效率,。

測試結(jié)果如下:

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目前層析工藝中所使用的保留時間通常介于5-10min, 本次實驗考察了2-50min保留時間內(nèi)wedge柱和傳統(tǒng)軸向?qū)游龉に嚨倪\行效果,。

圖中可見,軸向工藝隨著保留時間的縮短壓力上升顯著高于徑向工藝,,保留時間2min時軸向工藝反壓0.26 Mpa已經(jīng)逼近了一般軟膠的耐受壓力0.3Mpa,。

值得注意的是本次使用純水作為流動相,,實際研發(fā)及生產(chǎn)中上樣樣品為高濃度發(fā)酵上清,樣品性狀,、流動性等遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于純水,,上樣后頭部柱料高密度富集樣品,會造成更高的反壓,。

另外,,本次實驗使用聚合物硬膠填料進行測試,其壓力表現(xiàn)本來就顯著*于軟膠填料,,而目前研發(fā)及生產(chǎn)中軟膠市場仍然占據(jù)主導(dǎo)地位,,可以預(yù)見,在工業(yè)客戶軟膠層析的使用場景中,,wedge柱徑向工藝會展現(xiàn)出比本次硬膠填料測試更強勁的性能,。

本次測試保留時間2min時wedge柱徑向工藝反壓0.12Mpa,顯著低于傳統(tǒng)軸向柱反壓,,從而為更快的線性流速,、更短的保留時間提供了高效率層析的數(shù)據(jù)支撐。


03
徑向?qū)游黾夹g(shù)之核心優(yōu)勢


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徑向?qū)游龅奶攸c如下:

1)層析效率提高4倍以上

2)更好的柱效及分離趨勢

3)防?濃度依賴聚集沉淀和蛋?降解,,提高回收率

4)易于放?,,放?后占地更小

5)服務(wù)24+FDA批準(zhǔn)藥物,經(jīng)過市場驗證


徑向?qū)游黾夹g(shù)具有快速,、高效的核心優(yōu)勢,,對于進行中試及生產(chǎn)的客戶可大幅節(jié)省時間成本。

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