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廣州市艾貝泰生物科技有限公司

轉(zhuǎn)染都有哪些途徑可以實(shí)現(xiàn)?

時(shí)間:2023-2-2 閱讀:616
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  超聲波與電磁波相似,,可被反射,、折射和聚焦,其不同之處在于:前者傳播時(shí)需要彈性介質(zhì),,而后者則可在真空中自由傳播,。在固體介質(zhì)中超聲波的縱向波和橫向波均可傳播,而在氣體和液體介質(zhì)中只有縱向波可傳播,。紡織品染整加工一般為液液,、液固相體系,,因此對(duì)超聲波縱向波的研究更為重要。
 
  轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA,,RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù),它是研究基因表達(dá)調(diào)控,,突變分析等的常規(guī)工具。細(xì)胞轉(zhuǎn)染分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,。瞬時(shí)轉(zhuǎn)染是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,,存在于游離的載體上,不整合到細(xì)胞的染色體上,。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染是指DNA整合到宿主細(xì)胞的染色體中,。
 
  轉(zhuǎn)染途徑:
 
  1.電穿孔法:
 
  電穿孔靠脈沖電流在細(xì)胞膜上打孔而將核酸導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。本法需用特殊設(shè)置(電穿孔儀),,把懸浮狀態(tài)的受體細(xì)胞和供體DNA共同放入皿中(或杯中),,再施以高壓電脈沖,能夠促進(jìn)DNA通過(guò)細(xì)胞膜而進(jìn)入胞內(nèi),,并可整合到細(xì)胞的DNA中,,使細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化。若轉(zhuǎn)移的DNA為帶有選擇標(biāo)記基因的質(zhì)粒,,也可在選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行鑒定,。
 
  2.顯微注射
 
  本法是借助顯微注射器直接把DNA注射入核內(nèi),使之發(fā)生整合入受體細(xì)胞基因組中的技術(shù),。本技術(shù)需要有嚴(yán)密無(wú)菌的凈化室,,以免敞開(kāi)操作污染,同時(shí)要能有自動(dòng)拉針儀以制備顯微針,,一般用手動(dòng)拉針器拉制時(shí)要能使針末端有一個(gè)0.6cm長(zhǎng)的細(xì)部,,太長(zhǎng)易折斷,針尖開(kāi)口為2-3μm間,,針口小于1μm更佳,,針尖開(kāi)口大于5μm易刺傷細(xì)胞。
 
  3.基因槍
 
  基因槍依靠攜帶了核酸的高速粒子而將核酸導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi),??梢詫⒋蠓肿訉?dǎo)入細(xì)胞。

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