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熒光顯微鏡的使用方法

閱讀:2499      發(fā)布時間:2022-6-6
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熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收,、運輸,、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細胞中有些物質(zhì),,如葉綠素等,,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一,。  
它是以紫外線為光源,,用以照射被檢物體,使之發(fā)出熒光,,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置,。用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸,、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等,。細胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,,就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一,。  
反光鏡的反光層一般是鍍鋁的,因為鋁對紫外光和可見光的藍紫區(qū)吸收少,,反射達90%以上,,而銀的反射只有70%;一般使用平面反光鏡。  
專為熒光顯微鏡設(shè)計制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成,,分明視野聚光器和暗視野聚光器兩種,。還有相差熒光聚光器,。  
下面要為您介紹的是使用時可采用的方法:  
1、采用反射激發(fā)時,,先在光路中加入綠色激發(fā)濾光片組,,把照明可變孔徑光闌與視場光闌*打開,調(diào)節(jié)光源位置,,使照明光束通過物鏡轉(zhuǎn)換器的螺孔中央并使光源成象于物平面上,,此時物鏡螺孔應(yīng)是通孔(不裝物鏡)。檢查激發(fā)光束是否通過物鏡螺孔中央,,可在螺孔端面上放置半透明紙觀察光源光斑是否居中,,在某些顯微鏡中,光源是在垂直面內(nèi)調(diào)節(jié)其上下左右位置,,而光源成象是通過集光鏡沿軸方向移動來達到的,。  
2,、采用透射激發(fā)時,,可以使用蘭色光線根據(jù)普通明場照明法進行照明系統(tǒng)的調(diào)節(jié),這包括光源調(diào)節(jié)及聚光鏡中心的調(diào)節(jié),。如果采用暗場聚光鏡,,則還需要注意暗場聚光鏡的使用及調(diào)節(jié)方法,當(dāng)用蘭色光線調(diào)節(jié)好后,,就可采用更換濾色片的方法,,使標(biāo)本得到所需要的激發(fā)光線照射標(biāo)本,但要注意使遏止濾光片已在光路中,,這樣可以保護觀察者眼睛免受紫外線損傷,。  
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解熒光顯微鏡。

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