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肌酸激酶 MB 同工酶檢測試劑盒（酶聯(lián)熒光法）說明書

【產(chǎn)品名稱】 通用名稱：肌酸激酶 MB 同工酶檢測試劑盒（酶聯(lián)熒光法） 英文名稱：VIDAS CK-MB

【包裝規(guī)格】 30 人份/盒

【預期用途】 該產(chǎn)品用于定量測定人血清或血漿（肝素鋰或者 EDTA 抗凝）中的人類肌酸激酶 MB 同工 酶含量。 VIDAS CK-MB 是一種在 VIDAS 系列分析儀上使用的自動定量試驗,，使用 ELFA 技術（酶 聯(lián)熒光分析），定量檢測人血清或血漿（肝素鋰或者 EDTA 抗凝）中的人類肌酸激酶的 MB 同功酶,。 肌酸激酶是肌肉代謝的關鍵酶,，所有組織中都含有此酶，但是濃度不同,，形式各異（CK-MM,， CK-MB， CK-BB 等）[1],。在骨骼肌中,，發(fā)現(xiàn)肌酸激酶主要是 MM 變異體[1]。在腦中,，主要 是 BB 變異體,。而 MB 變異體主要發(fā)現(xiàn)在心臟組織中[1, 2]。 在沒有任何大的肌肉創(chuàng)傷的情況下,，血清 CK-MB 濃度的升高,，意味著發(fā)生了心肌梗死，對 心臟造成了壞死傷害,。一般來說,，在胸部疼痛發(fā)作后 5 小時，可以檢測到 CK-MB,，在心肌 梗死發(fā)生后 11 到 18 小時達到最高值[3, 4],。 不過，不管是病理性與否,，存在著某些其他情況,，在這些情況下可以觀察到 CK-MB 的升高， 比如杜興肌營養(yǎng)不良,、肌肉機能亢進,，體溫降低和體溫過高，以及心肌炎[2],。 VIDAS CK-MB 有助于對急性冠脈綜合征的診斷,。

【檢驗原理】 采用將酶免疫夾心法與最后熒光檢測(ELFA)相結合的分析原理[5, 6, 7]。 固相管（SPR®）在分析中除作為反應的固相表面,，也作為移液裝置,。反應試劑為即用型并 事先加入到試劑條上,，再將試條密封。 前清洗步驟準備好 SPR 以便進行反應,。然后,，樣品就被傳輸?shù)胶醒逑♂寗┑目字小?品/血清稀釋劑混合物循環(huán)進出 SPR 數(shù)次,。在清洗步驟中,，未結合的組分被消除。共扼物（堿 性磷酸酶標記的抗 CK-MM 抗體片段）被循環(huán)進出 SPR 數(shù)次,。沒有結合的組分在清洗步驟 中被消除,。 在最后檢測步驟當中，底物（磷酸 4-甲基傘形烷）循環(huán)進出 SPR,。共扼物酶催化水解底物 成熒光產(chǎn)物（4-甲基傘形酮）,，在450nm處測量其熒光強度。熒光強度與出現(xiàn)在標本中CK-MB 的濃度成正比,。 分析結束的時候,，根據(jù)儲存在存儲器中的校準曲線，由 VIDAS 自動計算結果,，然后打印輸 出,。

【主要組成成分】 試劑盒組成（30 個試驗）-試劑的重新溶解 30 個肌酸激酶 MB 同工酶試劑 條 STR 即用型 肌酸激酶 MB 同工酶檢測試劑盒（酶聯(lián)熒光法） 版本號 07709 K– CN - 2014/01 2 30 個肌酸激酶 MB 同工酶固相 管（ SPRs） 1 x30 SPR® 即用型 內(nèi)表面用單克隆抗 CK-MB 抗體免疫球蛋白（小鼠）敏化的 SPRs。 肌酸激酶 MB 同 工酶質控品 1 x 3 mL（凍干） C1 用 3 毫升稀釋液重新溶解,。等待 10~15 分鐘,。混勻,。重新溶解后 可在 2~8℃保存 24 小時,，分裝后，在-25±6℃下,，可保存至試劑 盒上標示的有效期,。 避免反復凍融。 在室溫下解凍（18~25℃）,。 蛋白質基礎（BSA）+ 化學穩(wěn)定劑+人類 CK-MB,。 MLE 數(shù)據(jù)范圍單位為 mIU/mL 范圍（每毫升毫國際單位）（質控 品 C1 劑量值范圍）。 肌酸激酶 MB 同 工酶校準品 1 x 3 mL（凍干） S1 用 3 毫升稀釋液重新溶解,。等待 10~15 分鐘,。混勻,。重新溶解后 可在 2~8℃保存 24 小時,，分裝后，在-25±6℃下,，可保存至試劑 盒上標示的有效期,。 避免反復凍融,。在室溫下解凍（18~25℃）。 蛋白質基礎（BSA）+ 化學穩(wěn)定劑+人類 CK-MB,。 MLE 數(shù)據(jù)濃度單位為 mIU/mL（校準品（S1）劑量值）,，（相對熒 光值）的置信區(qū)間（校準品（S1）相對熒光值范圍）。 稀釋液 1 x 20 mL（液體） R1 即用型 去離子水+0.9g/L 疊氮鈉 SPR 固相管 SPR 的內(nèi)表面用抗 CK-MB 小鼠單克隆免疫球蛋白包被,。每個 SPR 用 CKMB 為代碼識別,。 打開袋子后僅從袋子中取出需要數(shù)量的 SPR，然后仔細小心地重新密封好袋子,。 試劑條 試劑條有 10 個孔,，上面用貼有標簽的金屬箔片密封。標簽包括指示試驗類型的條碼,，試劑 盒批號和有效期。第一孔的金屬箔片被打孔,，以便加入標本,。每個試條的最后一個孔都是一 個熒光讀數(shù)孔，可以在其中進行熒光測定,。試條中間部分的孔含有分析需要的各種試劑,。 CK-MB 試劑條說明 孔號 試劑 1 標本 2 血清稀釋劑：Tris-NaCl（0.05mol/L, pH7.4），蛋白質和化學穩(wěn)定劑,， 疊氮鈉 0.9g/L（300µL） 3 清洗緩沖液：Tris-NaCl（0.05mol/L, pH7.4）,，蛋白質穩(wěn)定劑，疊氮 鈉 0.9g/L（600µL） 4 - 5 - 7 - 8 清洗緩沖液：Tris-NaCl（0.05mol/L, pH7.4）,，表面活性劑,，疊氮 鈉 0.9g/L（600µL） 6 共扼物：堿性磷酸酶標記的抗 CK-MM 多克隆抗體 Fab’片段（山羊） +緩沖液 Tris-NaCl（0.05mol/L, pH6），蛋白質穩(wěn)定劑,，疊氮鈉 0.9g/L （400µL） 9 空孔 10 加有底物的熒光讀數(shù)孔：磷酸 4-甲基傘形烷（0.6mmol/L）+二乙基 肌酸激酶 MB 同工酶檢測試劑盒（酶聯(lián)熒光法） 版本號 07709 K– CN - 2014/01 3 氨*（0.62mol/L,， 或 6.6%，pH9.2）+疊氮鈉 1 g/L（300µL） * 刺激性試劑： - R 36: 對眼睛有刺激性,。 - S 26 : 在與眼睛接觸的情況下,，立即用大量的水沖洗并尋求醫(yī)學幫助。 更多相關信息,，請參閱安全數(shù)據(jù)手冊（Safety Data Sheet） 必需但試劑盒中未提供的材料 ? 含有一次性滴頭的移液器,，用來分配 3mL 和 250µL 液體。 ? 沒有粉末的一次性乳膠手套,。 ? 其它特殊材料和耗材,，請參見儀器用戶手冊。

【儲存條件及有效期】 ? VIDAS CK-MB 試劑盒在 2~8℃儲存,。有效期 12 個月,。各組分有效期如表所示： STR 12 個月 SPR 12 個月 C1 12 個月 S1 12 個月 R1 12 個月 ? 切勿冷凍試劑,，重新溶解的質控品和校準品除外。 ? 在 2~8℃下儲存所有未使用的試劑,。 ? 打開試劑盒后,，檢查 SPR 袋子密封是否正確，是否有破損,。如果袋子密封不當,，或有 破損，請不要使用 SPR,。 ? 為保證 SPR 的穩(wěn)定性,，每次取出 SPR 后應仔細密封袋子，同時要把干燥劑放在里面,。 然后將整個試劑盒放回 2~8℃儲存,。 ? 如果按照推薦的條件儲存試劑，所有組分在標簽上指示的有效期之前都是穩(wěn)定的,。某 些特殊的儲存條件請參閱試劑盒組組成表,。

【樣本要求】 標本類型和采集 血清或血漿（用肝素鋰或者 EDTA 抗凝的）。 建議每個實驗室檢查所使用的采集試管的兼容性,。 以下因素對本試驗沒有顯著的影響： - 溶血（采用高濃度血紅蛋白樣本稀釋至：0 到 5g/L）（單體）,。 - 血脂（采用高濃度血脂樣本稀釋至：相當于 0 到 34.2mmol/L 甘油三酸酯） - 膽紅素血癥(采用高濃度膽紅素樣本稀釋至：0 到 850µmol/L)。 然而,，建議不要使用明顯溶血,、脂血或黃疸標本，如有可能,，再次采集新標本,。 標本的穩(wěn)定性 在 2~8℃條件下，密封標本最多能儲存 48 小時,。 如果要求儲存更長時間,，血清或血漿樣本則在-25±6℃冷凍。 肌酸激酶 MB 同工酶檢測試劑盒（酶聯(lián)熒光法） 版本號 07709 K– CN - 2014/01 4 避免反復凍融,。 在室溫下解凍（18~25℃）,。 一項對凍存了 5 個月的樣品的檢測結果的研究顯示結果質量不受影響。