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12381 無內毒素宏量質粒提取試劑盒

12381 無內毒素宏量質粒提取試劑盒

QIAGEN作為創(chuàng)新市場和技術的領dao者,，憑借強大的樣本制備和分析技術,，實現各種生物樣本內容物的高品質純化,、分析,。我們致力于幫助客戶在生命科學研究,、應用檢測,、制藥,、和分子診斷領域獲得成功和突破性進展,。由此讓生活的改善成為可能,。我們秉承市場、客戶,、病患至上的理念,，不斷推進多領域的創(chuàng)新和發(fā)展，充分發(fā)揮我們的樣本制備和分析技術專長,。

Qiagen 12381 無內毒素宏量質粒提取試劑盒 EndoFree Plasmid Mega Kit  5T,，產品簡介：

產品品牌：Qiagen

產品貨號：12381

產品名稱：無內毒素宏量質粒提取試劑盒

產品規(guī)格：5T

Qiagen 無內毒素宏量質粒提取試劑盒-常備現貨

Qiagen 12381 無內毒素宏量質粒提取試劑盒 EndoFree Plasmid Mega Kit  5T，產品說明：

特征

達到小于 0.1 EU/μg DNA

綜合內毒素去除

高拷貝質粒 DNA 的高產量

LyseBlue 可實現最佳裂解和最大 DNA 產量

產品詳情

無內切質粒試劑盒提供基于陰離子交換的快速無內毒素質粒 DNA 純化,。QIA過濾器濾芯可通過過濾快速清除裂解物,。純化的DNA純度超過2 x CsCl梯度離心獲得的純度，適用于高級轉染級應用,。EndoFree質粒緩沖液組合可用于制備10 mega或5 giga轉染級質?；騝osmid DNA制劑。

Performance

EndoFree質粒試劑盒將高效的內毒素去除步驟集成到質粒純化程序中——無需額外的提取或親和柱來去除脂多糖,。細菌裂解物通過QIAfilterMega-Giga或Maxi濾芯過濾進行清除,，質粒DNA在含有陰離子交換樹脂的重力流QIAGENjian端上純化。從培養(yǎng)物中純化 DNA 可獲得高達 10 mg （giga）,、2.5 mg（兆）和 500 μg（最大）的純化 DNA（培養(yǎng)體積取決于質?？截悢怠⒉迦肫未笮?、宿主菌株和培養(yǎng)基）,。純化的DNA不含內毒素（<0.1 EU/μg DNA）。

對于低拷貝質粒和cosmid的純化,，由于所需的培養(yǎng)體積大且QIAfilter超千兆質粒試劑盒的容量有限,，因此EndoFree質粒Mega試劑盒是比EndoFree Giga質粒試劑盒更好的選擇,。

無內切質粒試劑盒可去除裂解步驟中釋放的細菌內毒素，并影響DNA轉染到原代細胞和敏感培養(yǎng)細胞中,。從EndoFree質粒試劑盒獲得的無內毒素DNA非常適合在轉染中獲得可重復且可靠的結果,。QIAGEN超純無內毒素DNA也適用于基因治療研究和其他敏感應用。

*原代兔胃壁細胞轉染用按所示方法制備的pEGFP-N2（CLONTECH）,。使用Effectene轉染試劑進行轉染,。數據表示表達GFP的細胞百分比，通過對轉染后48小時的綠色熒光細胞數量進行評分來確定,。每種純化方法的轉染效率代表來自6種以上不同DNA制備的9至2個重復培養(yǎng)皿的平均效率,。（數據由美國佐治亞州奧古斯塔佐治亞醫(yī)學院分子醫(yī)學和遺傳學系 C. Chew 和 J. Parente 提供。

Principle

純化質粒DNA中的內毒素污染水平取決于所使用的純化方法,。二氧化硅漿液純化的DNA表現出ji高的內毒素水平,。QIAGEN、QIAfilter和HiSpeed質粒試劑盒以及2x CsCl超速離心可產生非常純的DNA,，內毒素水平相對較低,。EndoFree 質粒試劑盒包括一個集成的內毒素去除步驟,，可產生含有<0.1 EU/μg 質粒 DNA 的質粒 DNA,。

QIAfilter試劑盒以QIAfilter、HiSpeed和EndoFree質粒試劑盒形式提供,，是特殊的過濾裝置,，旨在取代細菌細胞堿性裂解后的離心。QIAfilter濾芯可wan全去除SDS沉淀物并清除細菌裂解物,，所需時間僅為離心所需時間的一小部分,，從而將質粒純化時間縮短多達1小時。QIAfilter超級千兆濾芯在室內真空下運行,，以最小的努力有效地清除大量細菌裂解物（請注意,，瓶子不包括在套件中）。QIAfilter Maxi 濾芯具有注射器形式,，通過將液體推入過濾器,，可在幾秒鐘內清除裂解物。

QIAGEN-tips中du特的陰離子交換樹脂專為核酸純化而開發(fā),。其zhuo越的分離特性使DNA純度等于或優(yōu)于連續(xù)兩輪CsCl梯度離心獲得的DNA純度,。預包裝的QIAGEN吸頭通過重力流運行，永bu干涸,，最大限度地減少了質粒制備所需的手動操作時間,。整個QIAGEN質粒純化系統(tǒng)避免使用苯fen、氯仿,、溴化乙錠和氯化銫等有毒物質,，最大限度地減少對用戶和環(huán)境的危害,。

內毒素，也稱為脂多糖或LPS,，是大腸桿菌等革蘭氏陰性細菌的細胞膜成分,。內毒素在質粒純化的裂解步驟中釋放，并顯著降低內毒素敏感細胞系的轉染效率,。此外,，內毒素可以通過與DNA競爭“游離"轉染試劑來影響轉染實驗中質粒DNA的攝取。內毒素還會誘導巨噬細胞和B細胞等免疫細胞中免疫應答的非特異性激活,，從而導致對轉染結果的誤解,。這些反應包括誘導蛋白質和脂質的合成，如IL-1和前列腺素,?？傮w而言，內毒素是轉染實驗設置中不可控的變量,，會影響結果和結果的可重復性,，使其難以比較和解釋。在基因治療研究中,，內毒素可以通過引起內毒性休克綜合征和補體級聯(lián)反應的激活來干擾,。