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1. 該試劑已經(jīng)過(guò)預(yù)稀釋,，可按每次測(cè)試的推薦體積使用,。我們通常在 100 μl 實(shí)驗(yàn)樣品中使用 1 × 10^6 個(gè)細(xì)胞（測(cè)試）。

2. 同型對(duì)照應(yīng)使用與目標(biāo)抗體濃度相同的濃度,。

3. 注意：

4. 在酸性條件下產(chǎn)生劇毒的肼氮酸,。丟棄前，請(qǐng)?jiān)诹魉邢♂尟B氮化物化合物,，以避免潛在爆炸性沉積物在管道中積聚,。

5. 有關(guān)熒光染料光譜和合適的儀器設(shè)置

6. PE-Cy5 是由 R-藻紅蛋白 （PE） 組成的串聯(lián)熒光染料，其被氬離子激光器的 488 nm 光激發(fā),，并作為能量供體與花青染料 Cy5 偶聯(lián),，后者充當(dāng)能量受體并在 670 nm 處發(fā)出熒光。BD Biosciences Pharmingen最大限度地提高了PE-Cy5中的熒光染料能量轉(zhuǎn)移，從而最大限度地提高了其熒光發(fā)射強(qiáng)度,，最大限度地減少了PE的殘余發(fā)射,，并最大限度地減少了批次間的變化。

7. PE-Cy5 經(jīng)過(guò)優(yōu)化,，可與發(fā)射 488 nm 光的單氬離子激光器配合使用,。由于 PE-Cy5 串聯(lián)熒光染料的吸收光譜較寬，因此在使用可能直接激發(fā) PE 和 Cy5™ 的雙激光細(xì)胞儀時(shí)必須格外小心,。

8. Cy 是 GE Healthcare 的商標(biāo),。

9. 在產(chǎn)品開(kāi)發(fā)中檢測(cè)到的物種交叉反應(yīng)性可能尚未在每種規(guī)格和/或應(yīng)用中得到證實(shí)。

10. 請(qǐng)遵守以下預(yù)防措施：可見(jiàn)光的吸收會(huì)顯著改變?nèi)魏未?lián)熒光染料偶聯(lián)物中發(fā)生的能量傳遞;因此,，我們建議采取特殊的預(yù)防措施（例如用鋁箔包裹樣品瓶,、試管或架子），以防止偶聯(lián)試劑（包括用這些試劑染色的細(xì)胞）暴露在室內(nèi)照明下,。

11. 據(jù)報(bào)道,，PE-Cy5 串聯(lián)熒光染料可通過(guò) Fc 受體結(jié)合某些類別的人巨噬細(xì)胞和粒細(xì)胞，并且 PE 可通過(guò) Fc 受體與小鼠 B 淋巴細(xì)胞結(jié)合,。小鼠白細(xì)胞與小鼠 BD Fc Block™ 純化的抗小鼠 CD16/CD32 mAb 2.4G2 預(yù)孵育可減少 PE-Cy5 偶聯(lián)試劑與小鼠 B 細(xì)胞的非特異性結(jié)合,。然而，PE-Cy5 偶聯(lián)試劑不應(yīng)用于 SJL,、NOD 和 MRL 小鼠的脾細(xì)胞染色,，因?yàn)閾?jù)報(bào)道，無(wú)論是否使用小鼠 BD Fc 阻滯™,，B 淋巴細(xì)胞和/或其他白細(xì)胞都會(huì)進(jìn)行非特異性染色（CD72c 復(fù)合物與這些菌株中的 PE-Cy5 結(jié)合有關(guān)）,。與 PE、PerCP,、PerCP-Cy5.5,、APC 和 APC-Cy7 串聯(lián)熒光染料偶聯(lián)的試劑可用于這些小鼠品系的白細(xì)胞。

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