淋巴細(xì)胞分離液的主要成分通常包括泛影酸鈉、聚蔗糖(如Ficoll)等高分子聚合物,以及注射用水等,。這些成分混合后形成一種密度介于1.075~1.090之間的近似等滲溶液,。其分離原理基于細(xì)胞密度差異,利用離心產(chǎn)生的重力加速度,,使不同密度的細(xì)胞在密度梯度中得以分離,。
淋巴細(xì)胞分離液使用方法:
試劑準(zhǔn)備:根據(jù)實驗需求準(zhǔn)備適量的淋巴細(xì)胞分離液和抗凝處理的血液樣本。同時,,可能需要準(zhǔn)備鹽緩沖液等輔助試劑,。
混合樣本:將抗凝處理的血液樣本與適量的淋巴細(xì)胞分離液混合,注意輕輕加入以避免劇烈攪拌導(dǎo)致細(xì)胞破壞,。
密度梯度離心:將混合液置于離心管中,,進(jìn)行密度梯度離心。離心時間通常為20~40分鐘,,離心速度根據(jù)實驗要求而定,。
收集細(xì)胞:離心后,淋巴細(xì)胞會聚集在密度梯度的某一特定層,。輕輕移除上層分離液和下層沉淀物后,,即可收集到淋巴細(xì)胞層。
細(xì)胞洗滌:為了去除可能殘留的血小板和其他雜質(zhì),,通常需要對收集到的淋巴細(xì)胞進(jìn)行洗滌,。
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