操作室厭氧環(huán)境形成:
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具;
2. 通電源開(kāi)照明燈,,開(kāi)溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度;
3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,,并放入美蘭指示紙(封閉);
4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門(mén),,并抽真空校驗(yàn);
5. 操作室內(nèi)初次置換(氮?dú)庵脫Q):
A. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
B. 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路,打開(kāi)氮?dú)饪刂崎y1,,使手套鼓起,,關(guān)閉閥門(mén)1,然后扎緊袋口;
6. 操作室D二次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一次充氮過(guò)程,取樣室先抽真空,,并注意隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣。如此連續(xù)三次氮?dú)庵脫Q,。
7. 操作室D四次置換(混合氣體置換):
(混合氣體配比為N2 85%,、H2 10%、CO2 5%)
A. 調(diào)換氣路打開(kāi)混合氣閥3進(jìn)氣,,充氣時(shí)取樣室先抽真空,,并隨時(shí)用腳踏開(kāi)關(guān)開(kāi)閉排氣;
B. 關(guān)掉混合氣體閥3,并打開(kāi)閥5,,使混合氣體經(jīng)過(guò)流量計(jì),,調(diào)整流量計(jì),流量為每分鐘10ml左右;
C. 混合氣體重復(fù)2-3次轉(zhuǎn)換,,經(jīng)過(guò)上述過(guò)程,,基本形成厭氧環(huán)境。
8. 操作室內(nèi)打開(kāi)粑粒除氧劑,,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧,,一小時(shí)后打開(kāi)美蘭指示紙觀察其變色狀況,不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;
9. 開(kāi)紫外線滅菌燈,,室內(nèi)進(jìn)行滅菌處理,,滅菌時(shí)間按具體實(shí)驗(yàn)自定。
菌種的置入和培養(yǎng):
1. 檢查取樣室內(nèi)門(mén)并關(guān)緊;
2. 打開(kāi)取樣室外門(mén),,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門(mén);
3. 取樣室充氮置換三次過(guò)程:打開(kāi)真空泵,,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開(kāi)氮?dú)忾y2進(jìn)氣,,使指針回復(fù)零位,,關(guān)掉閥2。D二次重復(fù)操作一次,。D三次操作時(shí),,使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開(kāi)閥4進(jìn)混合氣,,使指針回復(fù)零位,,關(guān)掉閥4。取樣室充氮置換三次過(guò)程結(jié)束;
4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);
5. 取樣室外門(mén)開(kāi)啟,、關(guān)緊,,再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗(yàn);
6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長(zhǎng)期連續(xù)使用的條件:
A. 每天在操作室內(nèi)打開(kāi)美蘭指示紙觀察,如不正常就重新?lián)Q氣;
B. 要長(zhǎng)期連續(xù)輸入微量的混合氣體,,使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难踅Y(jié)合通過(guò)催化吸收,,保證室內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;
C. 連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行一天,,更換一次除氧劑和干燥劑,。
D. 操作室內(nèi)溫度可任意選擇和控制,。
7. 混合氣瓶、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,,使輸出壓力0.1Mpa左右,。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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