1.盡量慢,。
我們在用固相萃取儀時,面臨的一個問題就是:液體應該以什么速率過柱流出,,我的經(jīng)驗是,,要想效果好,就要慢,,盡量慢,。.
對于固相萃取儀柱中的填料,,我們如果局部放大地看,能夠看到其實它們是有很多的空際,,液體流通的渠道很多,,如果流得快,相當比例的待測組分還來不及與填料充分作用就地從通道流失;所以要慢,,給它們一個充分作用的機會,。
如何慢呢?一個竅門就是不要用配合抽氣機使用的所謂固相萃取儀器,而采用再普通不過的重力法,。利用重力的作用使液體向下流出,。在實驗速度上,重力法遠不如吸力法,,但是在實驗效果方面,,重力法遠比吸力法優(yōu)勝,用吸力法只能得到譜帶吸附,,用重力法卻能得到柱頭吸附,,在速度和效果兩者的平衡中,我們還是傾向于優(yōu)先保證好的效果,。
舉例來說,,一個3ml500mg的C18小柱,如果加甲醇活化,,其甲醇全部流至篩板時間約為20分鐘,,而在過樣品液時,25ml 的液體*多2小時可以流完,,而且用重力法如果得當,,工作速率不比吸力法差很多。因為我們可以充分利用空閑時間,,用吸力法*須有人在旁邊守候,,而重力法由于不需要用電,可以充分利用午休和晚上時間過柱,,液體量大時接個堆疊接頭和延長管即可,,安排好實驗步驟,工作效率一樣很高,。另外,,重力法不需要抽氣機和固相萃取儀器。
2.盡量少,。
在固相萃取儀條件選擇上,,有人為了提高提取效率,盡量多加液體,或選擇填料量大的小柱,,我覺得大可不*如此,。尤其在用重力法時,由于效率高,,很多情況下是柱頭吸附,,并不是所有的填料都在起作用,填料多了不僅液體流出速度會更慢,,而且在洗脫時的擴散會很明顯,。
n. com因此建議,夠用就行,,在能保證效率時,,填料盡量少,加液也不宜多,。
3.實驗條件不宜過分細化,。
固相萃取儀從原理上是色譜分離,但是在操作時*好只把它作為吸附萃取劑使用,,由于填料性質,、松緊常有差異,因此在實際實驗中不*因為追求效果的*佳化而設計出很復雜的洗脫程序,。
在建立條件中,,我們應該盡量多利用現(xiàn)成的資料,盡快地建立起體系,,同時要對操作過于復雜的步驟保持警惕性,,在實驗效果,實驗速率和易操作性三者中取得平衡點,。
4.只用一次
固相萃取儀柱*好只用一.次,。因為從嚴格的意義上來說,很多物質的吸附是不可逆的,,一次吸附,, 無法洗脫,影響著下一次吸附,,雖然有人做過重復利用的實驗,,但是總體來說為了節(jié)省- -點經(jīng)費而大大增加了結果的不可靠性和不確定性,是很不合算的行為,。
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