氣體是哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。氧氣參與三羧酸循環(huán),產(chǎn)生供給細(xì)胞生長增殖的能量和合成細(xì)胞生長所需用的各種成分。開放培養(yǎng)時一般把細(xì)胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中,。CO2既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關(guān)系,。動物細(xì)胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境,,pH為7.2~7.4,以不超出6.8~7.6為宜,。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,隨著CO2釋放量的增多,培養(yǎng)基會變酸,,因此常在培養(yǎng)基中加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構(gòu)成一個緩沖對)來調(diào)節(jié)pH,。NaHCO3具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個反應(yīng)的進行,。培養(yǎng)箱中CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中NaHCO3濃度相平衡,,如果培養(yǎng)箱中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量應(yīng)為1.97 g/L,;如果CO2濃度維持在10%,,則NaHCO3的加入量應(yīng)為3.95 g/L。 控制二氧化碳濃度,,這就是為什么二氧化碳培養(yǎng)箱成為細(xì)胞或組織體外培養(yǎng)環(huán)境的重要原因,。
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