實(shí)驗(yàn)動(dòng)物丨使用Tonopen眼壓計(jì)測(cè)量大小鼠眼壓——探究小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞
目的
觀察青光安Ⅱ號(hào)方及其不同濃度有效組分對(duì)青光眼模型小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:選取8只正常對(duì)照的C57BL/6小鼠,,以及48只38周齡的DBA/2J小鼠,,后者用于建立慢性高眼壓青光眼模型。所有動(dòng)物均獲得適宜的飼養(yǎng)條件和充足的食水,。
分組與處理:DBA/2J小鼠隨機(jī)分為6組:模型組,、益脈康分散片組,、青光安Ⅱ號(hào)方湯劑組以及青光安Ⅱ號(hào)方有效組分的低、中,、高濃度組,。正常對(duì)照組C57BL/6小鼠灌胃蒸餾水。模型組小鼠也接受蒸餾水處理,,而其他治療組小鼠分別接受相應(yīng)的藥物或有效組分的灌胃,。
眼壓測(cè)量:所有動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前進(jìn)行了為期3天的適應(yīng)性飼養(yǎng)。眼壓的測(cè)量是在小鼠清醒狀態(tài)下進(jìn)行,,由兩名實(shí)驗(yàn)人員配合完成,。使用Tono-pen AVIA接觸式眼壓計(jì),每隔4周在上午9:00至12:00期間進(jìn)行一次測(cè)量,。每只小鼠的眼壓值取連續(xù)10次測(cè)量的平均值作為該次測(cè)量的結(jié)果,,同時(shí)確保LCD上顯示的置信指標(biāo)達(dá)到或超過(guò)95%,以保證測(cè)量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與可靠性,,為研究提供了可靠的基礎(chǔ)數(shù)據(jù),。
視網(wǎng)膜組織學(xué)檢查:使用HE染色觀察視網(wǎng)膜組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,通過(guò)TUNEL染色評(píng)估視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的凋亡情況,。
統(tǒng)計(jì)分析:采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,,計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,通過(guò)單因素方差分析(ANOVA)及后續(xù)多重比較測(cè)試來(lái)比較不同組之間的差異,。P值小于0.05被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,。




高濃度的青光安Ⅱ號(hào)方有效組分可以明顯改善青光眼模型小鼠的視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu),抑制視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡,,激活Wnt/β-Catenin/Pax6信號(hào)通路,,為青光眼的治療提供了新的研究方向和潛在的治療手段。