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平板菌落計(jì)數(shù)法步驟
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訪問次數(shù)：7540更新時(shí)間：2024-12-30 08:46:03
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產(chǎn)品簡介
| 產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 典型配置 | 全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀 |
|---|---|---|---|
| 價(jià)格區(qū)間 | 面議 |
產(chǎn)品介紹
平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測(cè)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后,，其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞,，取一定量的稀釋樣液接種到平板上,，經(jīng)過培養(yǎng)，由每個(gè)單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,，即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞,。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù),。但是,，由于待測(cè)樣品往往不易*分散成單個(gè)細(xì)胞,，所以，長成的一個(gè)單菌落也可來自樣品中的2～3或更多個(gè)細(xì)胞,。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低,。為了清楚地闡述平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果，現(xiàn)在已傾向使用菌落形成單位(colony-forming units,，cfu)而不以菌落數(shù)來表示樣品的活菌含量,。
平板菌落計(jì)數(shù)法雖然操作較繁，結(jié)果需要培養(yǎng)一段時(shí)間才能取得,，而且測(cè)定結(jié)果易受多種因素的影響,，但是，由于該計(jì)數(shù)方法的優(yōu)點(diǎn)是可以獲得活菌的信息,，所以被廣泛用于生物制品檢驗(yàn)(如活菌制劑),，以及食品、飲料和水(包括水源水)等的含菌指數(shù)或污染程度的檢測(cè),。
平板菌落計(jì)數(shù)法操作步驟
1,、編號(hào)
取無菌平皿9套，分別標(biāo)明為10-4,、10-5,、10-6各三套，另取6支無菌試管分別標(biāo)記為10-1,、10-2,、10-3、10-4,、10-5,、10-6。
2,、稀釋
用1mL無菌吸管吸取1mL已充分混勻的大腸桿菌菌懸液,，精確地放0.5mL至10-1的試管中，此即為10倍稀釋,，將多余的菌液放回原菌液中,。
將10-1試管充分振蕩、混勻,。另取一支1ml吸管插入10-1試管中來回吹吸菌液三次,，進(jìn)一步將菌體分散、混勻,。動(dòng)作不要太猛太快,，吸時(shí)插入，吹時(shí)提出,，再用此吸管吸取10-1菌液1mL,，精確地放0.5mL至10-2試管中,，此即為100倍稀釋，依次類推,，
3,、取樣
用三支1ml無菌吸定分別吸取10-4、10-5,、10-6的稀釋菌懸液各1mL,，對(duì)號(hào)放入編好號(hào)的無菌平皿中，每個(gè)平皿放0.2mL
4,、倒平板
盡快向上述盛有不同稀釋菌液的平皿中倒入融化后冷卻至45度的LB培養(yǎng)基約15-20ml,，置水平位置迅速旋動(dòng)平皿，使培養(yǎng)基與菌液混合均勻,。
5,、培養(yǎng)
倒置于37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，
6,、計(jì)數(shù)
算出同一稀釋度三個(gè)平板上的菌落平均數(shù),，并按下列公式進(jìn)行計(jì)算； 每毫升中菌落形成單位（cfu）= 同一稀釋度三次重復(fù)的平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×5
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